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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 如何根据紫外吸光度确定高效液相吸收波长？
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slmu3404

金虫 (正式写手)

[求助] 如何根据紫外吸光度确定高效液相吸收波长？

一未知样，要求进行HPLC检测。
首先，我进行了紫外波长扫描，在200处A为0.1为最大，其他波长下A值有0.06、0.03.。。等，还有负值的。
请问，这个可以作为高效液相检测波长的确定吗？？？如不可以请给予指导。。。
谢谢帮忙！！！
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加油
1楼 2011-06-27 12:34:56
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News

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

slmu3404(金币+1): 谢谢 2011-06-27 16:14:21
可不可以对样品进行衍生化，增强紫外吸收呢？
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水滴石穿！！
2楼2011-06-27 12:48:31
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zhuiyu_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

slmu3404(金币+1): 谢谢 2011-06-27 16:14:13
先确定一下你的紫外扫描样品浓度是多少。会不会太低。如果浓度比较高还是这样，可以采用别的检测器。比较常用的有蒸发光检测器和示差折光检测器。这两种主要可以检测样品没有紫外吸收的。
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3楼2011-06-27 12:54:25
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shelly8059

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

slmu3404(金币+1): 谢谢 2011-06-27 16:14:03
slmu3404(金币+1): 2011-07-01 10:43:14
紫外波长扫描，在200处A为0.1为最大，说明两点，1你的样品没有紫外吸收，可以使用其他检测器代替，如示差折光检测器RID；2你的样品可以使用210nm波长进行分析检测，因为考虑到流动相的截止吸收波长。
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海阔凭鱼跃，天高任鸟飞！
4楼2011-06-27 13:29:49
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orange2008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

slmu3404(金币+1): 2011-06-29 12:45:24
引用回帖:
Originally posted by shelly8059 at 2011-06-27 13:29:49:
紫外波长扫描，在200处A为0.1为最大，说明两点，1你的样品没有紫外吸收，可以使用其他检测器代替，如示差折光检测器RID；2你的样品可以使用210nm波长进行分析检测，因为考虑到流动相的截止吸收波长。

说的相当有道理，还要看下你样品配的浓度，一般是要最大吸收波长处得吸光度在0.3-0.7
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5楼2011-06-29 09:52:52
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lordxia

新虫 (初入文坛)
shelly8059 说得很对，很有可能是你的待测物质无紫外吸收，建议增加浓度再看看或换检测器
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6楼2011-07-01 17:13:44
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guoanzhong

新虫 (小有名气)
高效液相中的紫外检测器最低检测下限是210nm，到考虑到流动相的紫外吸收相应，一般都会大于210nm的。看来你的样品不适合使用紫外检测器，你可以试试将其连上其他的取代基，比如说连上苯环等有紫外吸收的化合物
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每天坚持一点儿！
7楼2011-07-02 11:52:53
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一点相思

银虫 (初入文坛)
在200nm处出现最大值，说明你的样品都测不出峰值啊
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8楼2012-05-10 09:39:12
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