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枚馨言子

铜虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌DH5a与S17-1区别是什么啊?有知道的朋友麻烦告诉一下,谢谢

麻烦问一下大家:大肠杆菌DH5a与S17-1区别是什么啊?有知道的朋友麻烦告诉一下,谢谢
还有,将重组质粒转化到S17-1中后,可不可以用这个S17-1/重组子 菌种来提取质粒啊?
提到的质粒会不会被甲基化或者受S17-1别的影响啊?急求高手答案,O(∩_∩)O谢谢啦~
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-24 20:15:28
枚馨言子: 回帖置顶 2012-02-21 21:07:57
区别是基因型不一样,也可以提取质粒,参考下面:
大肠杆菌DH5α:
F-endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169,hsdR17(rK- mK+), λ–
An Hoffman-Berling 1100 strain derivative (Meselson68)
Promega also lists phoA
nalidixic acid resistant
References:
FOCUS (1986) 8:2, 9.
Hanahan, D. (1985) in DNA Cloning: A Practical Approach (Glover, D.M., ed.), Vol. 1, p. 109,IRL Press, McLean, Virginia.
Grant, S.G.N. et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 4645-4649 PMID 2162051.
Meselson M. and Yuan R. (1968) Nature 217:1110 PMID 4868368.

大肠杆菌S17-1 Genotype: recA pro hsdR RP4-2-Tc::Mu-Km::Tn7
Growth Conditions: Protocol: plus trimethopirm (10 mcg/ml)
Temperature: 37.0°C
Applications: transformation host
Comments: Recommended mobilization host for pARO180, pARO190, pARO181, and pARO191 (ATCC 77123-77126, respectively) because it contains chromosomally integrated tra genes. [29601]
A kanamycin-sensitive strain devoid of the E. coli K-12-specific restriction system allowing efficient uptake of foreign DNA. [41566]
The properties of streptomycin, trimethoprim, and spectinomycin resistance were verified.
RP4-Tc::Mu-Km::Tn7 is integrated into the chromosome. [29601]
References: 29601: Parke D. Construction of mobilizable vectors derived from plasmids RP4, pUC18 and pUC19. Gene 93: 135-137, 1990. PubMed: 2227423
30953: Simon R, et al. A broad host range mobilization system for in vivo genetic engineering: transposon mutagenesis in Gram negative bacteria. Bio-Technology 1: 784-791, 1983.
41566: McFarlane GJ, et al. A simplified method for conjugal gene transfer into the filamentous cyanobacterium Anabaena sp. ATCC 27893. J. Microbiol. Methods 6: 301-305, 1987.
2楼2011-06-24 18:15:59
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叶子萌

新虫 (初入文坛)

楼主有 E.coli S17-1 这个菌啊,能不能寄株给我? 购买或者交换都可以的。我这儿有 DH5a, JM109 和 BL21 (可以His tag 融合表达的菌)。 万分感谢!
我的邮箱: fanshicun070503@163.com
3楼2011-08-27 16:51:52
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枚馨言子

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 叶子萌 at 2011-08-27 16:51:52:
楼主有 E.coli S17-1 这个菌啊,能不能寄株给我? 购买或者交换都可以的。我这儿有 DH5a, JM109 和 BL21 (可以His tag 融合表达的菌)。 万分感谢!
我的邮箱: fanshicun070503@163.com

麻烦你给我个QQ号,我得过一个月时间才能寄给你了,不好意思刚刚看到留言
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4楼2012-02-21 21:06:36
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叶子萌

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我从一个质粒菌种保藏中心拿到了一个,但是感觉有问题,ATCC里说S17-1是没有卡纳抗性的,但是我的S17-1有呃,是不是在传代过程中突变了?
5楼2012-02-21 21:53:11
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枚馨言子

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
谢谢您
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6楼2012-02-26 12:28:45
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dmzha

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
2357652楼: Originally posted by 叶子萌 at 2012-02-21 21:53:11:
我从一个质粒菌种保藏中心拿到了一个,但是感觉有问题,ATCC里说S17-1是没有卡纳抗性的,但是我的S17-1有呃,是不是在传代过程中突变了?

S17-1是有卡纳抗性的,因为它的染色体中插入了一个转座子,该转座子包含卡纳抗性基因。需要做结合转移,能否给我寄一份?O(∩_∩)O谢谢!
7楼2012-03-22 09:29:51
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lwq652

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2375768楼: Originally posted by dmzha at 2012-03-22 09:29:51
S17-1是有卡纳抗性的,因为它的染色体中插入了一个转座子,该转座子包含卡纳抗性基因。需要做结合转移,能否给我寄一份?O(∩_∩)O谢谢!...

怎么会有卡那抗性呢,那个kana已经插入失活了吧
一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
8楼2012-12-26 15:42:37
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lwq652

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2357652楼: Originally posted by 叶子萌 at 2012-02-21 21:53:11
我从一个质粒菌种保藏中心拿到了一个,但是感觉有问题,ATCC里说S17-1是没有卡纳抗性的,但是我的S17-1有呃,是不是在传代过程中突变了?

你确定不是提交菌种的单位坑了你,据我所知现在往菌种保存中心递交的菌株不一定就是报到的那株,有时候是商业、行政的需要。我们实验室之前买一株恶臭,他寄过来的是金黄,后来我们投诉之后,菌种保存中心把钱退回来了
一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
9楼2012-12-26 15:46:21
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indica

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2467770楼: Originally posted by lwq652 at 2012-12-26 15:46:21
你确定不是提交菌种的单位坑了你,据我所知现在往菌种保存中心递交的菌株不一定就是报到的那株,有时候是商业、行政的需要。我们实验室之前买一株恶臭,他寄过来的是金黄,后来我们投诉之后,菌种保存中心把钱退回 ...

求曝光国内哪家菌种保存中心, 难道是北京那家, 还准备过几天在那买...  看来买回来要16s一下才可以.
10楼2013-03-06 18:44:22
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