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ET生物人

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
用核酸定量分析儀就OK啦!!
11楼2011-06-24 21:40:42
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kikiru824

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+2): 鼓励 2011-06-27 16:55:05
这个首先要看要测定的DNA量的大概范围,10ng以上的可以用Nanodrop去测(OD260/280),如果是少于10ng以下的,nanodrop一般就侧不准了,可以稀释到一定的范围之内(10pg-500pg/ul),可以用Beacon 2000 instrument荧光测定法检测,但检测的原理不一样结果会有一定的误差,当然十分微量的DNA可以根据标准曲线通过RT-PCR定量测定,实际上十分准确的测定DNA的浓度是很难的,包括出现降解等情况就不知道准确的浓度了~
12楼2011-06-25 22:36:32
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yueh

铜虫 (初入文坛)

我是RNA学习了
yueh
13楼2011-06-26 09:26:17
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4everxubo

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by ET生物人 at 2011-06-24 21:40:42:
用核酸定量分析儀就OK啦!!

请问,我要用selective DNA pooling这个方法构建DNA 池,要求精度是4ng/μl 用NanoDrop 不可以准确定量么?老外他们都用的PIcoGreen (molecular probes)但是实验室没这个条件。。
14楼2012-02-29 21:51:02
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4everxubo

木虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by kikiru824 at 2011-06-25 22:36:32:
这个首先要看要测定的DNA量的大概范围,10ng以上的可以用Nanodrop去测(OD260/280),如果是少于10ng以下的,nanodrop一般就侧不准了,可以稀释到一定的范围之内(10pg-500pg/ul),可以用Beacon 2000 instrument荧 ...

请问,我要用selective DNA pooling这个方法构建DNA 池,要求精度是4ng/μl 用NanoDrop 不可以准确定量么?老外他们都用的PIcoGreen (molecular probes)但是实验室没这个条件。。
15楼2012-02-29 21:51:46
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kikiru824

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
4ng/ul用nanodrop似乎不行了,也可以试试,尽管nanodrop的检测下限是2ng/ul,但是浓度太低,没有明显的峰了,误差较大,可以试试看(浓度低可以用荧光法但是成本高了点,检测不如nanodrop方面
16楼2012-03-01 09:08:52
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4everxubo

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
16楼: Originally posted by kikiru824 at 2012-03-01 09:08:52:
4ng/ul用nanodrop似乎不行了,也可以试试,尽管nanodrop的检测下限是2ng/ul,但是浓度太低,没有明显的峰了,误差较大,可以试试看(浓度低可以用荧光法但是成本高了点,检测不如nanodrop方面

非常感谢,打算做做试试,现在还有个备份方案,就是用Real-Time PCR
17楼2012-03-01 09:43:09
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