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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA如何定量
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ET生物人

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
用核酸定量分析儀就OK啦!!
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11楼2011-06-24 21:40:42
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kikiru824

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+2): 鼓励 2011-06-27 16:55:05
这个首先要看要测定的DNA量的大概范围，10ng以上的可以用Nanodrop去测（OD260/280),如果是少于10ng以下的，nanodrop一般就侧不准了，可以稀释到一定的范围之内（10pg-500pg/ul），可以用Beacon 2000 instrument荧光测定法检测，但检测的原理不一样结果会有一定的误差，当然十分微量的DNA可以根据标准曲线通过RT-PCR定量测定，实际上十分准确的测定DNA的浓度是很难的，包括出现降解等情况就不知道准确的浓度了~
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12楼2011-06-25 22:36:32
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yueh

铜虫 (初入文坛)
我是RNA学习了
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yueh
13楼2011-06-26 09:26:17
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4everxubo

木虫 (小有名气)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by ET生物人 at 2011-06-24 21:40:42:
用核酸定量分析儀就OK啦!!

请问，我要用selective DNA pooling这个方法构建DNA 池，要求精度是4ng/μl 用NanoDrop 不可以准确定量么？老外他们都用的PIcoGreen （molecular probes）但是实验室没这个条件。。
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14楼2012-02-29 21:51:02
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4everxubo

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by kikiru824 at 2011-06-25 22:36:32:
这个首先要看要测定的DNA量的大概范围，10ng以上的可以用Nanodrop去测（OD260/280),如果是少于10ng以下的，nanodrop一般就侧不准了，可以稀释到一定的范围之内（10pg-500pg/ul），可以用Beacon 2000 instrument荧 ...

请问，我要用selective DNA pooling这个方法构建DNA 池，要求精度是4ng/μl 用NanoDrop 不可以准确定量么？老外他们都用的PIcoGreen （molecular probes）但是实验室没这个条件。。
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15楼2012-02-29 21:51:46
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kikiru824

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
4ng/ul用nanodrop似乎不行了，也可以试试，尽管nanodrop的检测下限是2ng/ul，但是浓度太低，没有明显的峰了，误差较大，可以试试看（浓度低可以用荧光法但是成本高了点，检测不如nanodrop方面
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16楼2012-03-01 09:08:52
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4everxubo

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
16楼: Originally posted by kikiru824 at 2012-03-01 09:08:52:
4ng/ul用nanodrop似乎不行了，也可以试试，尽管nanodrop的检测下限是2ng/ul，但是浓度太低，没有明显的峰了，误差较大，可以试试看（浓度低可以用荧光法但是成本高了点，检测不如nanodrop方面

非常感谢，打算做做试试，现在还有个备份方案，就是用Real-Time PCR
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17楼2012-03-01 09:43:09
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