24小时热门版块排行榜    

查看: 781  |  回复: 8
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhanghui8126

银虫 (小有名气)

[交流] 对正相柱使用的一些疑问----(1)

前段时间我测罗库溴铵的时候,老是不敢用10%的水冲,怕冲坏柱子,最近我试了一下,采用乙腈-0.025mol/L四甲基氢氧化铵溶液(9:1),分析完后用乙腈-水(9:1)冲柱并保存柱子还是可以的。

  据我所知,正相柱一般不能用含水的溶剂冲柱,我打电话询问了一些色谱厂
家,都要求不能这样冲,其实只是相对的,用少量的水来冲还是可以的,并且还能改善色谱峰的分离度。不过我这次用的色谱柱是ALLTECH硅胶柱,主峰在2.5min左右出峰,出峰稍快了一点,还没有试过其它的色谱柱。  
  请使用过正相柱的朋友多多交流.
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsq402

铁杆木虫 (著名写手)

首先你得样品是不是罗库溴铵? 峰保留推迟,如果有没有分开的峰应该会分的更好吧?所以你的7.5min的峰会不会是柱子没有平衡好呢?

在欧洲药典会的网站上有一些介绍: http://extranet.pheur.org/4DLink1/4DCGI/Web_View/mono/1764
还有在线的色谱图:
http://extranet.pheur.org/4DLink1/pdfs/chromatos/1764.pdf

这里提到的填料是 :
Related substances Hypersil silica  
Chlorides IonPac AG9-SC guard column and IonPac AS9-SC column  

有关物质是用hypersil硅胶柱,我们实验室有这种柱,大连以利特有卖的。它的特点是硅胶的孔径大,12nm的,比表面积低,可能是吸附要弱些吧。建议你换这个柱子试试。新买回来的正相柱,一般都用含正己烷的流动相保存,首先你用低流速的 异丙醇把原来的流动相替出。然后再用含水的90%乙腈冲洗柱子,如果短期内还要用,就一直放90%乙腈里保存。
另外,我在dxy看到有人讨论说药典上的那个流动相比较难平衡柱子,你在做样之前有必要充分平衡。

还有理论踏板数,在cp2005中 一般是说不低于2000吧?11000是ep规定的吗?我在它的ep标准里没有看到。

我还有个问题想请教下,ep里面把氯化物定入了标准中,是出自何用意?本来这个品种就是做成含氯化钠的注射液啊,为什么还要对氯进行控制呢?
(Each mL contains 10 mg rocuronium bromide and 2 mg sodium acetate. The aqueous solution is adjusted to isotonicity with sodium chloride and to a pH of 4 with acetic acid and/or sodium hydroxide.
6楼2006-11-02 09:14:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

wsq402

铁杆木虫 (著名写手)

0.5

★ ★
shich68(金币+2):谢谢积极参与虫友之间的交流互动!欢迎以后多多交流!
硅胶柱用的时候,流动相含10% 水应该没什么问题吧。如果长时间不用,是不是考虑下保存在正己烷-异丙醇里呢?

主峰2.5分钟?因为不知你的柱长和流速,不过我想现在做药物的还很少用 100,50mm的柱子吧。以常规的250mm,流速1ml/min,死体积大约在2.5min,呵呵。

怀疑你的方法是否使样品保留了。
2楼2006-10-18 16:12:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhanghui8126

银虫 (小有名气)

我用的是250*4.6的长柱,流速按标准做的,2ml/min,柱温30
就是出峰快的很,1ml/min,2.5min左右出峰,峰形较好,由于没有
杂质标准品,还没有看分离度的情况,如果调成0.5ml/min的话,出
峰就在5min了,柱子应该没有保留吧.

    有做过罗库溴铵的同仁请指点一二,也请使用过正相柱的朋友
多提意见.不胜感激!!
3楼2006-10-19 19:12:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsq402

铁杆木虫 (著名写手)

我查了下,罗苦溴铵和维库溴铵一样吧,应该在色谱体系里至少有2个大主峰吧?
一个是溴离子峰 210nm,它有很强的吸收,一个是主峰。你的色谱图里看到了几个峰?
标准是EP吗?EP里已经收录了,四甲基氢氧化铵溶液 好像是0.05mM,好像出峰时间是8-9分钟吧。

“1ml/min,2.5min左右出峰,峰形较好”,会不会是溴离子峰,而主峰没出来,或者是没有保留,溴离子峰和主峰重叠在一起了?

[ Last edited by wsq402 on 2006-10-27 at 09:26 ]
4楼2006-10-27 09:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见