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董珍珍

新虫 (小有名气)

[求助] 有关使用转染试剂Lipofectamine2000的问题

在网上看到使用Lipofectamine 2000,有这样一句话:“对于每孔细胞,使用50μl OPTI-MEMⅠ培养基稀释1μl-3μl LIPOFECTAMINE 2000试剂。Lipofectamine 2000稀释后保温5分钟。如果DMEM做为Lipofectamine 2000的稀释液,必须在5分钟内同稀释的DNA混合。”不明白为什么要在5分钟内同稀释的DNA混合?那如果使用DMEM稀释Lipofectamine 2000,要保温多短的时间最好呢?希望知道的老师指点。谢谢。
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

董珍珍(金币+2): 2011-08-09 19:46:22
貌似是脂质体会失效。我以前转染的时候都是基本4~5min和稀释的DNA混合,混合液放置不超过25min加入细胞的。
2楼2011-06-21 11:28:15
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