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邱少玲

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】如何摸索高效液相的流动相条件

Sample Text我现在做一个中药的血清药物化学实验,药材用60%以纯提取后分别用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到干燥后乙酸乙酯层、正丁醇层和水层,现在各个层要做高效液相,,没有对照品,又不知各个层的大概成分,不懂如何摸索它们的流动相条件,请教各位高手,急救啊!!!
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kkbyb

木虫 (著名写手)

找个光电二极管阵列检测器的或质谱检测器的,走一个反相色谱,10%有机相-90%有机相的梯度,看看情况,然后调整梯度和波长,至于是什么成分,做不出来,只能靠制备液相收集测核磁了,如果能力比较高的人也可以从LC-MS看
2楼2011-06-21 10:08:12
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pjh2011

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你好,我师兄是做血清药物化学的,最后也是用高效液相色谱进行检测各成分,跟你做的很相似,给你讲讲我师兄怎么做的,希望对你有帮助

1、先查下文献,看你的那个中药材主要有什么成分,乙醇提取后有哪些成分进入到有机相
2、然后查下那些成分在环己烷、乙酸乙酯、正丁醇中会分别进入哪些相中,环己烷、乙酸乙酯、正丁醇的极性依次递增,按相似相容原理,应该也是极性大的进入正丁醇的可能性大
3、然后就是摸高效液相的流动相条件了,根据极性,大概确定是用乙腈还是甲醇或者正丁醇或者水相(可以加些三乙胺或者冰醋酸等),我们实验室用的最多就是这些流动相,应该大家都差不多吧,嘿嘿
4、没有对照品的话,要确定是什么物质,最后就只能质谱了,像我师兄最后成分归属用的是UPLC-MS联用技术的

  希望对你有用啊
3楼2012-04-10 11:58:44
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心清北音hjq

木虫 (小有名气)

引用回帖:
1401877楼: Originally posted by kkbyb at 2011-06-21 10:08:12
找个光电二极管阵列检测器的或质谱检测器的,走一个反相色谱,10%有机相-90%有机相的梯度,看看情况,然后调整梯度和波长,至于是什么成分,做不出来,只能靠制备液相收集测核磁了,如果能力比较高的人也可以从LC-MS看

一篇日文的翻译过来,不通顺,请帮忙看看是神马意思。溶解条件:把被A90%与B10%的混合溶解液平衡之后的样本注入Column(容器?)之后,经过50分钟,溶解液B的比例从10%变成90%的同时,流出(希出)溶解液A和溶解液B。
有机搬砖
4楼2012-12-08 12:13:09
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