应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达
81/1返回列表
查看: 998  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

da_da

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达

为什么要表达某个蛋白，要先把这个蛋白的基因连接到克隆载体上，再用PCR扩增，最后连到表达载体上，直接连接到表达载体上不行吗？新手，不太懂，希望懂的人帮解答下。谢谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢
心有多大，江湖就有多大！
1楼 2011-06-12 11:26:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
da_da(金币+1): 2011-06-12 16:23:07
西瓜(金币+3): 赞成 2011-06-12 18:00:58
引用回帖:
Originally posted by da_da at 2011-06-12 11:26:42:
为什么要表达某个蛋白，要先把这个蛋白的基因连接到克隆载体上，再用PCR扩增，最后连到表达载体上，直接连接到表达载体上不行吗？新手，不太懂，希望懂的人帮解答下。谢谢！

你说的是一般流程，PCR后连接到克隆载体的目的测序和扩增。
也有一些不连克隆载体，直接连表达载体的。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-06-12 11:51:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

101202139

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
da_da(金币+2): 2011-06-12 16:23:26
西瓜(金币+2): 欢迎交流 2011-06-12 18:02:18
个人认为，顾名思义，克隆载体和表达载体的功能是不同，一个主要是克隆，另一个是表达。克隆载体对应的是克隆宿主菌，表达载体对应的是表达宿主菌。我们把目的基因克隆到克隆载体上是为了让目的基因大量克隆来验证目的基因是连接到克隆载体上了，而且提质粒的过程中，克隆宿主菌要比表达宿主菌相对效率较高，条带较亮。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-06-12 12:05:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘怀

金虫 (正式写手)

品质工程师

【答案】应助回帖

西瓜: …… 2011-06-12 17:52:13
da_da(金币+1): 2011-06-15 10:08:24
基因的表达一般需要五个步：提取目的基因，导入基因载体，pcr扩增（就是基因的复制），复制的同时基因解旋，复制成信使RNA,信使RNA从细胞核中转移到细胞质间完成蛋白质的表达。
而你所说的表达载体即使信使RNA,而目的基因只有通过复制解旋才能转化为RNA,完成基因的表达。要想使目的基因表达首先待将目的基因导入能进行复制的细胞中，这就需要基因载体（此载体只能从微生物中提取，且再导入的细胞体内能独立存在，独立复制，不影响细胞的复制，能与细胞体和平相处）。基因载体与表达载体不是一回事。
赞一下(1人) 回复此楼
努力就有回报
4楼2011-06-12 12:20:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gagalady

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
da_da(金币+2): 2011-06-12 16:23:44
西瓜(金币+3): 有道理啊 2011-06-12 18:02:03
连克隆载体有个用途是测序
测序是检测在目的带最初扩增的时候有没有变异，比如碱基的缺失 替换什么滴
生物公司的测序也是一种特殊的PCR，这种PCR也需要引物，所以T载体的引物就叫做公共引物。
楼主认为直接连接到表达载体也无不可，只需要在测序是提供适合该载体的测序引物即可。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-06-12 12:33:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 刘怀 at 2011-06-12 12:20:38:
基因的表达一般需要五个步：提取目的基因，导入基因载体，pcr扩增（就是基因的复制），复制的同时基因解旋，复制成信使RNA,信使RNA从细胞核中转移到细胞质间完成蛋白质的表达。
而你所说的表达载体即使信使RNA,而 ...

在哪看来的？肯定不是学分子生物学的！
赞一下 回复此楼
6楼2011-06-12 14:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuifen1108

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 说得很有道理啊 2011-06-22 21:37:43
克隆载体具有表达功能这是毋庸置疑的，否则抗性基因怎么表达？阳性克隆载体怎么筛选？表达载体主要区别于克隆载体的在于其表达的可控性，具有增强子、启动子等元件，基因的表达可以受到诱导剂等的控制。克隆载体的优点一般是高拷贝（当然也有例外如BAC等）,而表达载体则不一定需要高的拷贝数。一家之言，仅供参考。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-06-22 20:44:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍遥狂骑

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by gagalady at 2011-06-12 12:33:12:
连克隆载体有个用途是测序
测序是检测在目的带最初扩增的时候有没有变异，比如碱基的缺失 替换什么滴
生物公司的测序也是一种特殊的PCR，这种PCR也需要引物，所以T载体的引物就叫做公共引物。
楼主认为直接连接 ...

哦  是这样呀   明白了  谢谢
赞一下 回复此楼
8楼2011-07-24 15:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 da_da 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 15/750 2026-08-10 19:29 by 要乐观耀哥
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭