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475502411

铜虫 (著名写手)

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Originally posted by 天使托 at 2011-06-10 09:31:25:
这个当然可以的。。。
只要你把大肠杆菌的感受态细胞做好，细胞效率高就没有什么问题。。。

谢谢你，你做过吗？我终于找到我实验设计的了。希望能指点一下，我有好多问题呢，谢谢诶，期待回复！！

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可以朝九晚五，也能浪迹天涯

11楼2011-06-12 19:16:17

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啮风

铜虫 (小有名气)

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Originally posted by 475502411 at 2011-06-12 19:11:10:
但是实验需要，我见外文有蚊香是这样报道的，他们的实验叫complement experiment。就是将发生变异的基因重新连接到载体上，在转入存在变异的菌株，看基因变化对菌体的影响。那怎么办啊》？

complement experiment叫回复实验，一般是用来验证基因功能的，打个比方，你用随机突变的方法，得到很有意思的突变株，然后呢，你找到这个被突变的基因，这时候呢，你可以发一篇稍微低的文章，高一点的文章，会让你做complement experiment实验，就是你扩增得到一个完整的突变基因，然后转到突变株，如果这个基因是产生突变的主要原因，那么突变株应该恢复到野生株状态，当然啦，这是理想状态，一般很难做到一个很好的complement experiment，就得另想加数据了。
扯远了，回到你的问题，那么怎么将外源质粒转到细菌里，一个是接合（这个得看运气，不是所有野生菌株，都能接合成功，接合后的稳定也是很大问题），第二个就是电转，同样也面临这上述问题。
当然有文献支持，你成功的概率就比较大了。

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12楼2011-06-13 01:42:57

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475502411

铜虫 (著名写手)

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Originally posted by 啮风 at 2011-06-13 01:42:57:
complement experiment叫回复实验，一般是用来验证基因功能的，打个比方，你用随机突变的方法，得到很有意思的突变株，然后呢，你找到这个被突变的基因，这时候呢，你可以发一篇稍微低的文章，高一点的文章，会 ...

谢谢你，假如说的的电转化成功了，怎么筛选啊？怎么确定哪个菌落是转化子啊？因为我的菌本身具有一定的耐药性！

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可以朝九晚五，也能浪迹天涯

13楼2011-06-13 08:30:51

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