24小时热门版块排行榜    

查看: 1101  |  回复: 18
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看

475502411

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-06-10 09:31:25:
这个当然可以的。。。
只要你把大肠杆菌的感受态细胞做好,细胞效率高就没有什么问题。。。

谢谢你,你做过吗?我终于找到我实验设计的了。希望能指点一下,我有好多问题呢,谢谢诶,期待回复!!
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
11楼2011-06-12 19:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

啮风

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-06-12 19:11:10:
但是实验需要,我见外文有蚊香是这样报道的,他们的实验叫complement experiment。就是将发生变异的基因重新连接到载体上,在转入存在变异的菌株,看基因变化对菌体的影响。那怎么办啊》?

complement experiment叫回复实验,一般是用来验证基因功能的,打个比方,你用随机突变的方法,得到很有意思的突变株,然后呢,你找到这个被突变的基因,这时候呢,你可以发一篇稍微低的文章,高一点的文章,会让你做complement experiment实验,就是你扩增得到一个完整的突变基因,然后转到突变株,如果这个基因是产生突变的主要原因,那么突变株应该恢复到野生株状态,当然啦,这是理想状态,一般很难做到一个很好的complement experiment,就得另想加数据了。
扯远了,回到你的问题,那么怎么将外源质粒转到细菌里,一个是接合(这个得看运气,不是所有野生菌株,都能接合成功,接合后的稳定也是很大问题),第二个就是电转,同样也面临这上述问题。
当然有文献支持,你成功的概率就比较大了。
12楼2011-06-13 01:42:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 啮风 at 2011-06-13 01:42:57:
complement experiment叫回复实验,一般是用来验证基因功能的,打个比方,你用随机突变的方法,得到很有意思的突变株,然后呢,你找到这个被突变的基因,这时候呢,你可以发一篇稍微低的文章,高一点的文章,会 ...

谢谢你,假如说的的电转化成功了,怎么筛选啊?怎么确定哪个菌落是转化子啊?因为我的菌本身具有一定的耐药性!
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
13楼2011-06-13 08:30:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-06-12 19:16:17:
谢谢你,你做过吗?我终于找到我实验设计的了。希望能指点一下,我有好多问题呢,谢谢诶,期待回复!!

有什么问题可以PM我。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
14楼2011-06-13 09:14:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-06-13 09:14:16:
有什么问题可以PM我。

好的,谢谢!
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
15楼2011-06-13 13:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

475502411(金币+1): 2011-06-14 09:06:58
你说的“任意”范围太大 不确定性太多

5、8楼的建议可以!

大肠很好转的,反正你有抗性标记的,筛选也方便的。

就是制作感受态比较麻烦!
生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
16楼2011-06-13 13:34:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwbk

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-06-12 19:11:10:
但是实验需要,我见外文有蚊香是这样报道的,他们的实验叫complement experiment。就是将发生变异的基因重新连接到载体上,在转入存在变异的菌株,看基因变化对菌体的影响。那怎么办啊》?

反正都要做感受态的,~~~做完感受态可以选择电转或者化转,能做电转就做电转,效率高。不过电转化感受态细胞离子浓度不能高,否则会啪啪的电火花哦~~~
17楼2011-06-13 15:13:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

送鲜花一朵
谢谢大家对我的帮助,我有点思路了,明天开始做,有结果我会和分享的,再次感谢
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
18楼2011-06-14 09:08:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

602059625

金虫 (知名作家)

引用回帖:
Originally posted by 啮风 at 2011-06-13 01:42:57:
complement experiment叫回复实验,一般是用来验证基因功能的,打个比方,你用随机突变的方法,得到很有意思的突变株,然后呢,你找到这个被突变的基因,这时候呢,你可以发一篇稍微低的文章,高一点的文章,会 ...

专家不常有,有就一定要收听
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
19楼2011-06-16 18:24:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 475502411 的主题更新
信息提示
请填处理意见