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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助各位虫友--去除PCR产物中的3‘端A尾
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daiguoying

木虫 (小有名气)

[求助] 求助各位虫友--去除PCR产物中的3‘端A尾

各位虫友，PCR遇到一个棘手问题，请教大家了：

我用LA tag酶 扩增质粒全长，但会得到末端带A，这是我不需要的，怎样去除末端A
用pfu可以吗？用量多少，怎样操作，查文献没找到呢，谢啦~~
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DO NOT LOSE TIME
1楼 2011-06-06 13:25:03
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薄荷西红柿

新虫 (初入文坛)
你好我现在遇到你几年前的情况，请问后来你的A尾怎么去掉的，或者用pfu扩增出来了吗。我的是6000多，一直是用taq可以，换高保真就不行。
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11楼2018-03-22 20:37:26
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daiguoying

木虫 (小有名气)
顶啊，各位高人求指点啊~~
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DO NOT LOSE TIME
2楼2011-06-07 20:16:14
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
换一个酶就行了，酶很多的
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-06-07 21:08:28
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daiguoying

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-06-07 21:08:28:
换一个酶就行了，酶很多的

你好，我因为要P一个3200bp的质粒，所以就买了LAtag酶...据说可以用pfu酶72度反应，但具体的反应时间不清楚，有哪位高人晓得~~万分感激~~啊
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DO NOT LOSE TIME
4楼2011-06-07 22:01:14
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