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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 测定米曲霉酶活为负值
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wanglei512

金虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by 漂漂米曲霉 at 2011-06-07 16:55:43:
检测温度是指什么啊？
固态发酵一直这么做的，方法和操作和这个一模一样，在测酶活的时候，都是从水浴锅里拿出来，放置一段时间，凉了之后再测得，42度的时候也测过。跟那个没什么太大关系的

40和42差别不大，不是温度的问题
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11楼2011-06-10 08:48:30
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wanglei512

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
酶活是负值的情况我也遇见过，我感觉不是离心、温度的事情，因为有对照组。一般酶活为负值，说明没有产生酶，可能是发酵的时间不够。比如细菌在无机盐的板子上长的很慢，但是在LB的板子上长的很快。还有你现在换了培养基，改变了菌的生长环境，你去看看一些关于发酵条件的优化就知道，培养基里成分的改变会显著影响酶活的。你两次培养基成分应该是不一样的吧。
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12楼2011-06-10 09:09:35
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swqowen

金虫 (职业作家)

勋章归天
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
出现负值有这种情况：1.空白没有校准0,2，你的OD设置参数的时候，波长从大波长到小波长，而且区间不要太大，主要是调零，基线设计准，然后在做对照试验
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13楼2011-06-10 14:03:30
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Nirvana灬鵬

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
有可能是测酶活的时候稀释倍数太大了，就可能出现负值
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14楼2011-07-10 22:04:49
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892091690

银虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
702619楼: Originally posted by 漂漂米曲霉 at 2011-06-03 23:52:58:
本人测定米曲霉的酶活
开始做固态发酵时数值都为正数，但是在开始做液态发酵后发现所测酶活都为负值，药品试剂都没有问题，
加1mL菌液，42℃水浴 5min
空白加2mL三氯乙酸，正常样品加1mL酪素
然后42℃水浴 10 ...

最近也在做米曲霉固态发酵 想跟你请教下 测酶活一般要将原液稀释多少倍才好啊？我提取的淀粉酶，提取后酶液放冰箱冻几天还有活性么？谢谢~~
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你必须把必须走的路走漂亮，才可以走想走的路。
15楼2012-03-22 11:57:35
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翠西26

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是空白没有做好...
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16楼2012-04-23 10:28:55
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zengsimin

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我想请教下楼主测固体曲的时候样品前处理是怎么做的？就是用蒸馏水将粗酶液浸出来么？还有你提到有国标？
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17楼2012-10-08 14:02:58
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