| 查看: 2712 | 回复: 23 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yuxia82012木虫 (著名写手)
|
[求助]
gel-shift蛋白结合DNA的问题
|
||
最近做gelshift研究蛋白与DNA的结合，在用不同量得蛋白与DNA反应后，跑5%的非变性聚丙烯酰胺凝胶，扫图见下，这个结果看出来是结合了，但是感觉有点不正常，主要是跑完后，在同样的曝光度下，蛋白量加的多的泳道DNA信号很弱，加大曝光度后可以明显看见上面有结合，不知道这是不是有问题，怎么证明这个蛋白是特异结合这段DNA而不是随便什么DNA都能结合呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有289人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
|
楼主这个体系里面加非特异性竞争DNA了吗，鲑精DNA或者polyDIDC都可以，如果加了50倍或100倍的竞争DNA还是有明显的结合，那应该就是真的了。然后再做DNA足迹（DNase I footprinting）可以找到具体的结合位点。DNA足迹自己做可能不太好做，需要专门的平台，一般实验室都没有，这个可以去找公司。我们实验室是在上海吐露港生物科技有限公司做的，他们直接给我们做好能发表的图，现在文章已经发了。楼主可以看一下， J. Bacteriol.-2013-Wang-2595-602 他们公司网址：www.tolobio.com 电话：400-032-6070 邮箱：support@tolobio.com 直接打电话跟他们联系就行，发邮件也行。 |
22楼2015-05-20 09:45:07
yuxia82012
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 4980
- 散金: 2225
- 红花: 2
- 帖子: 1340
- 在线: 426.5小时
- 虫号: 781881
- 注册: 2009-05-29
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
2楼2011-06-03 09:43:16
3楼2011-06-23 09:05:30
yuxia82012
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 4980
- 散金: 2225
- 红花: 2
- 帖子: 1340
- 在线: 426.5小时
- 虫号: 781881
- 注册: 2009-05-29
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
4楼2011-06-23 10:40:16