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大家评论下这个不伦不类的银染方法
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银染法分为强碱法和弱碱法,我用师姐之前做过的方法,具体描述如下,大家评论下这个不伦不类的方法(既非强碱法亦非弱碱法啊,伤不起呀) 电泳后采用银染的方法,银染[12]主要步骤:(1)去离子水洗脱3min;(2)10%乙酸固定10min;(3)去离子水洗脱2min;(4)银染15min(0.1%AgNO3);(5)去离子水洗脱0.5min;(6)显影液脱色6min(16gNaOH, 8ml37%甲醛溶液,用ddH2O定溶至1L);(7)10%乙酸固定1min;(8)去离子水洗脱,最后用相机或是在凝胶成像系统中拍照。 PS:顺便问下,甲醛的作用是什么?一般要加多少量?还有,弱碱法底色是浅,但会不会造成条带分辨率不是很好呢? 小女子这厢谢过大家(*^__^*) 嘻嘻 |
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大家说说你们做聚丙烯酰胺凝胶电泳时银染法的小窍门啦。
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xiadongliang
金虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 欢迎应助。能否顺便回答下楼主顺便问的问题呢,嘿嘿 2011-06-03 18:31:39
墨池(金币+1): 2011-06-03 20:32:37
西瓜(金币+3): 欢迎应助。能否顺便回答下楼主顺便问的问题呢,嘿嘿 2011-06-03 18:31:39
墨池(金币+1): 2011-06-03 20:32:37
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1. 固定液(乙醇 50 mL,冰醋酸2.5 mL)固定15 min 2. Milli-Q纯水清洗,20 s和2 min各一次 3. 银染液(硝酸银1 g,37%甲醛0.75 mL)染色15 min 4. Milli-Q纯水清洗,20 s和2 min各一次 5. 显色液(氢氧化钠7.5 g,37%甲醛2.5 mL)显色5-7 min 6. 最后用终止液(乙醇50 mL,冰醋酸2.5 mL)终止反应 |
3楼2011-06-03 13:58:22
xiadongliang
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4楼2011-06-03 13:59:38







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