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ppt1210

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 求教真菌细胞破壁问题

想请教下蘑菇细胞破壁问题,之前看别人的帖子有些是酵母的细胞破壁的。。
因为条件限制,我使用了超生破壁,效果一般,菌丝还能勉强破一下,但是效率不高;
菌核我先干燥后磨成粉,通过相差显微镜发现基本都断成短的棒状了,但是胞内成分还是在细胞壁里面,没有出来,超声也没效果,请问怎么才能把这些东西从细胞壁里洗出来啊?

另外,有没有更好的破壁方法?因为目的是要得到细胞壁,要以不破坏细胞壁成分为原则,所以化学法都没敢尝试。。。

ps:看到有说用玻璃珠的,但是不知道怎么操作,求教。。。
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rural2084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+1): 就是手动磨吗?我可能要磨的比较多,这样太慢了啊 2011-05-30 17:35:20
效果最好的就是用液氮研磨;也可以试试石英砂研磨!
2楼2011-05-30 15:50:51
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raindrop8316

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+1): 嗯 是很硬,我是先干燥,然后用机器磨成粉的,但是细胞内的东西还是没弄出来 2011-05-30 17:36:19
同意沙发的,我以前磨菌核就是用液氮磨的,效果很好。只不过那东西太硬了,我先用水跑软,切碎后再用液氮磨的
书到用时方恨少 钱到月底不够花
3楼2011-05-30 16:30:03
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2, EPI+1): 酶和玻璃珠 推荐 2011-05-30 17:28:30
ppt1210(金币+2): 嗯,不过这样一来好烦琐啊,而且没有一个确切的参数可以控制呢 2011-05-30 17:39:07
ppt1210(金币+1): 2011-06-01 20:39:06
真菌的细胞壁非常厚,简单的只用一种方法来破壁我觉得效果一般。
我建议几种方法结合使用,lyticase酶消化、液氮-热水反复冻融、液氮研磨、石英砂研磨等等。
与人玫瑰手有余香
4楼2011-05-30 16:44:05
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