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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 淀粉酶的吸光度
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swqowen

金虫 (职业作家)

勋章归天

[求助] 淀粉酶的吸光度

按照国标法做测试淀粉酶的活性，可是每次到最后的反应液加入稀释成的碘液和盐酸失活时里立马颜色变成黑紫色，吸光度根本没发测试！开始以为是酶的浓度太高（稀释100倍（后来稀释10000倍还是那样，谁做过这方面的，请教一下，是不是淀粉过期了（可溶性淀粉都是先配先做的）还是其他什么问题？
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1楼 2011-05-30 13:25:31
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米曲霉淀粉酶

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
507510楼: Originally posted by swqowen at 2011-05-30 18:13:08
空白试验方法：准确吸取20ml 2%可溶性淀粉溶液，置人50ml比色管中．加5ml pH6．0缓冲溶液，摇匀．于7OC水浴预热5min，准确加入lml稀释酶液(酶活力为每毫升60-100单位为宜)，立即计时，摇匀，于70C水浴准确保温酶解 ...

楼主你好：请问你最后用碘法测出来还是用的上面的实验方案吗？可溶性淀粉是水配的还是用缓冲液配的啊？淀粉液和缓冲液比例还是4：1吗？终止酶反应的盐酸量还是0.5ml吗？小弟很急啊 跪求指点啊
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36楼2012-10-18 09:43:53
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jianghongyu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
swqowen(金币+2): 2011-05-30 16:33:37
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-05-31 21:46:53
你可以采用DNS（3、5二硝基水杨酸）法测定酶活
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2楼2011-05-30 15:34:15
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从现在做起

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

swqowen(金币+3): 我在重新配置 2011-05-30 16:33:40
是不是酶的问题，那样似乎淀粉根本没有被水解
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3楼2011-05-30 15:39:30
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ppsu303

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

找不到问题，就都重新配吧
一样一样的来，实验无捷径，耗得起时间和精力吧
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你懂的~~
4楼2011-05-30 16:10:34
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