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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 连接温度
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churmi

银虫 (正式写手)

[求助] 连接温度

连接16度过夜， 但是现在室温就比16度高，水龙头里出来的水都要19度

水浴锅设置到16度就老叫，大家看看怎么解决？

谢了
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1楼 2011-05-28 16:21:32
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yabxxh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

churmi(金币+1): 2011-05-28 20:51:36
PCR仪，如果允许的话，这个是最好的。
不允许的话，自己制造16度，用冰调好温度，温度计测量无误后，装入泡沫盒或者隔热容器，在泡沫盒外面套一个大号的，小泡沫盒外面放上冰袋，ok。
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2楼2011-05-28 16:47:44
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-06-07 18:31:37
做一般载体构建（文库除外），现在有很多连接酶都是室温快连的，比如NEB的连接酶，说明书上说室温10min，我自己做时候，20-25度1h足够
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3楼2011-05-28 18:13:39
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怎么都行

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 正解 2011-06-07 18:31:47
当然用PCR仪或者金属浴是最好的，还可以用层析柜，培养箱等一切能定温的仪器。
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4楼2011-05-28 20:47:58
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churmi

银虫 (正式写手)
好的了解，谢谢
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5楼2011-05-28 20:52:46
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
不用追求16度，温度稍微高一些也行。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-05-29 00:58:59
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dream-fish

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
silicare(金币+3): 很活跃， 欢迎常来生物综合版 2011-06-07 18:32:19
室温30min就好了，连接酶的最适合温度是37°，但是为了防止错误连接，以及方便粘性末端退火，才用相对比较低的温度。
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7楼2011-06-07 16:43:39
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