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churmi

银虫 (正式写手)

[求助] 连接温度

连接16度过夜, 但是现在室温就比16度高,水龙头里出来的水都要19度

水浴锅设置到16度就老叫,大家看看怎么解决?

谢了
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yabxxh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

churmi(金币+1): 2011-05-28 20:51:36
PCR仪,如果允许的话,这个是最好的。
不允许的话,自己制造16度,用冰调好温度,温度计测量无误后,装入泡沫盒或者隔热容器,在泡沫盒外面套一个大号的,小泡沫盒外面放上冰袋,ok。
2楼2011-05-28 16:47:44
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-06-07 18:31:37
做一般载体构建(文库除外),现在有很多连接酶都是室温快连的,比如NEB的连接酶,说明书上说室温10min,我自己做时候,20-25度1h足够
3楼2011-05-28 18:13:39
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怎么都行

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 正解 2011-06-07 18:31:47
当然用PCR仪或者金属浴是最好的,还可以用层析柜,培养箱等一切能定温的仪器。
4楼2011-05-28 20:47:58
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churmi

银虫 (正式写手)

好的了解,谢谢
5楼2011-05-28 20:52:46
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

不用追求16度,温度稍微高一些也行。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-05-29 00:58:59
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dream-fish

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
silicare(金币+3): 很活跃, 欢迎常来生物综合版 2011-06-07 18:32:19
室温30min就好了,连接酶的最适合温度是37°,但是为了防止错误连接,以及方便粘性末端退火,才用相对比较低的温度。
7楼2011-06-07 16:43:39
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