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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酯酶培养基
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cherrysyp

新虫 (初入文坛)

[求助] 酯酶培养基

现在用宏基因组文库构建的方法来筛选酯酶，问题出在了选择性培养基的配置上。

看文献里面多是以1%的三丁酸甘油酯为底物来诱导阳性克隆的出现，但是我在LB基础上加1%的三丁酸甘油酯以后出现了培养基总是不凝的问题，涂板的时候轻轻一涂就容易坏。
请问谁在这方面有研究，求高人指点啊！

谢谢！
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1楼 2011-05-20 20:39:29
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zmw_520

禁虫 (小有名气)
★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励交流 2011-05-21 18:52:03
本帖内容被屏蔽
2楼2011-05-21 10:36:32
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cherrysyp

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zmw_520 at 2011-05-21 10:36:32:
难得难得，我和你做的是一样的，我也看文献，三丁酸甘油酯是底物，产酯酶的菌不是在平板上应该有透明圈嘛，我这里有一株别人筛好的菌，我画板之后没有透明圈~~~不晓得你作出透明圈了不？？？

我直接拿土壤样品涂，看到了有2个透明圈。
现在就是培养基总是很软，一涂就破了。
你找到透明圈了吗？我们可以交流下啊！
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3楼2011-05-21 12:31:01
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zmw_520

禁虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1): 很热烈啊 鼓励 2011-05-21 18:52:39
本帖内容被屏蔽
4楼2011-05-21 13:19:53
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cherrysyp

新虫 (初入文坛)
1949stone: 很好 可以交朋友啊 2011-05-21 18:52:54
引用回帖:
Originally posted by zmw_520 at 2011-05-21 13:19:53:
因为我主要任务是拿到酯酶的基因，原本就有一株筛好了的菌，所以我没筛菌，直接就做基因克隆那一块了，但是我把那株菌画板到培养基上它没有透明圈啊，直接LB加三丁酸甘油酯就可以了是不？？？我之前配的培养基里还 ...

那你加氯化钙的原理是怎样的啊，你QQ多少啊，加好友吧，方便交流
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5楼2011-05-21 15:52:53
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丫头-小东

铜虫 (初入文坛)
你好，最近小弟也在做酯酶这一块，想问一下你们的三丁酸甘油酯是如何加到LB琼脂培养基中的，需要用乳化剂处理？还是直接加入就可以了？
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6楼2017-12-06 15:31:29
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