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cherrysyp

新虫 (初入文坛)

[求助] 酯酶培养基

现在用宏基因组文库构建的方法来筛选酯酶,问题出在了选择性培养基的配置上。

看文献里面多是以1%的三丁酸甘油酯为底物来诱导阳性克隆的出现,但是我在LB基础上加1%的三丁酸甘油酯以后出现了培养基总是不凝的问题,涂板的时候轻轻一涂就容易坏。
请问谁在这方面有研究,求高人指点啊!

谢谢!
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zmw_520

禁虫 (小有名气)

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励交流 2011-05-21 18:52:03
本帖内容被屏蔽

2楼2011-05-21 10:36:32
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cherrysyp

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by zmw_520 at 2011-05-21 10:36:32:
难得难得,我和你做的是一样的,我也看文献,三丁酸甘油酯是底物,产酯酶的菌不是在平板上应该有透明圈嘛,我这里有一株别人筛好的菌,我画板之后没有透明圈~~~不晓得你作出透明圈了不???

我直接拿土壤样品涂,看到了有2个透明圈。
现在就是培养基总是很软,一涂就破了。
你找到透明圈了吗?我们可以交流下啊!
3楼2011-05-21 12:31:01
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zmw_520

禁虫 (小有名气)


1949stone(金币+1): 很热烈啊 鼓励 2011-05-21 18:52:39
本帖内容被屏蔽

4楼2011-05-21 13:19:53
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cherrysyp

新虫 (初入文坛)

1949stone: 很好 可以交朋友啊 2011-05-21 18:52:54
引用回帖:
Originally posted by zmw_520 at 2011-05-21 13:19:53:
因为我主要任务是拿到酯酶的基因,原本就有一株筛好了的菌,所以我没筛菌,直接就做基因克隆那一块了,但是我把那株菌画板到培养基上它没有透明圈啊,直接LB加三丁酸甘油酯就可以了是不???我之前配的培养基里还 ...

那你加氯化钙的原理是怎样的啊,你QQ多少啊,加好友吧,方便交流
5楼2011-05-21 15:52:53
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丫头-小东

铜虫 (初入文坛)

你好,最近小弟也在做酯酶这一块,想问一下你们的三丁酸甘油酯是如何加到LB琼脂培养基中的,需要用乳化剂处理?还是直接加入就可以了?
6楼2017-12-06 15:31:29
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