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zhanghyd金虫 (初入文坛)
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求助Glutamate uptake assay的详细操作方法
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| 各位同仁，哪位做过神经胶质细胞Glutamate uptake assay，能否将详细操作方法及注意事项与我共享，我的联系信箱zhanghyd@163.com,非常感谢！急盼！ |
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2楼2011-05-20 10:22:43
【答案】应助回帖
zhanghyd(金币+3): 这个方法我看过，不是很详细，我需要详细的方法，不过还是要谢谢你 2011-05-21 22:48:37
zhanghyd(金币+2): 2011-07-21 03:33:34
zhanghyd(金币+2): 2011-07-21 03:33:34
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谷氨酸摄取反应总体系500μl，含Krebs-碳酸氢盐缓冲液，含50μg突触体蛋白的一定量待测物。25℃水浴10min后，加入37kBq/mmol3H-L-Glu(lmmol/L)混匀，25℃水浴反应5min，加入冷的Krebs缓冲液终止反应，迅速经0.22μm硝酸纤维素膜抽滤，并用Krebs缓冲液冲洗反应管和滤膜3遍，将滤膜放入液闪瓶中、加入5ml甲苯闪烁液(含0.5%PPO，0.02%POPOP，10%甲醇和10%乙醇)及1ml乙二醇乙醚暗化过夜，在液闪计数器3H谱道测定样品的放射性强度。 祝卫国 陈学敏 甲基汞对大鼠脑突触体谷氨酸摄取的抑制作用 卫生研究 1999年第4期第28卷 |
3楼2011-05-21 10:17:25