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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
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grapes

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

额，这个可能是手法问题，或者你的梳子和胶板不配套？
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11楼2011-05-23 14:14:36
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gbtgwm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
adslye(金币+1): 鼓励交流~ 2011-09-26 09:12:57
可能是浓缩胶的问题，你仔细看靠近分离胶的位置是不是有波浪状的突起，有的话就对了
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12楼2011-09-25 16:49:28
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
adslye(金币+1): 鼓励交流~ 2011-09-26 09:13:13
感觉TEMEB加的好多啊  
你的现象没见过     
只见过浓缩胶是不齐，有点扩散    到分离胶就好了   是因为浓缩胶凝固时间太短

你做胶的夹子是什么样的啊   类似 bio-rad？
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13楼2011-09-25 21:27:44
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happy2011

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我遇到过，主要原因是板和胶有缝隙。
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14楼2011-09-26 10:19:52
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yqq161

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也遇到了相同的问题，我试过全程用10%分离胶跑就没有漏过，所以应该是浓缩胶的问题，期待问题解决啊~~
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15楼2011-11-08 18:15:17
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qiang7

金虫 (小有名气)
好久不来了！感谢大家的回复！总之细心就没事了！这段时间又莫名其妙的好了不漏了！自己都找不到原因！当然在制备完胶在装槽时也有可能微微错动俩玻璃板所致吧 ！
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16楼2011-11-08 22:37:03
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣
我也做过电泳，不过做的不多，我一般是在电泳缓冲液里拔，可以好拔一点，你试试吧！仅供参考！
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dasheng1980
17楼2011-12-09 20:22:59
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kly312254857

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
估计是梳子插得太紧的缘故吧。。拔梳子之前，先将胶板固定好，加上电泳缓冲液，在上样前，缓慢拔掉梳子，上样孔可用微量注射器针头冲洗残留的胶。如果胶齿不正，可用针头略加调整
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18楼2012-02-23 23:10:45
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

个人建议，仅供参考！
首先，问个问题，你是用移液枪上样还是用微量进样器上样？
1.感觉你的问题是浓缩胶和分离胶接触层没有处理好，分离胶液封的表面尽量用折过无毛刺的滤纸吸干，但一定不要碰到分离胶；
2.如果用微量进样器上样，注意一定不要触碰到胶孔底部；
3.可以检查一下梳子和玻璃板是否配套，有很多规格的，比如0.5mm、1.0mm等。
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19楼2012-10-29 09:46:19
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喵一咪

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

点样过程枪头在制胶板之间嵌得过深使得板子有轻微分离也会导致样品扩散。制胶不要太软，用百分之95的乙醇封胶，如果倒不干净用滤纸吸一下。点样孔我在做的过程中也发现总有一两个会不能用，仔细检查一下梳子，在左右两侧有两个小小的点，如果经常用力拔梳子可能会把它弄断所以两侧的孔就不能用了，希望对你有帮助
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20楼2012-12-11 16:22:25
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