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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切条带
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xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] 酶切条带

很奇怪的一件事，酶切完电泳条带与PCR产物对比，多了一条大于PCR产物的条带？？求解~~~
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1楼 2011-05-17 20:47:42
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xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lijunj at 2011-05-17 22:58:01:
是不是PCR产物序列中含有两个相同的酶切位点？

是的，而且不止两个，除了SNP处的酶切位点之外，分别在在上下游引物结合靶序列处还各有一个相同的酶切位点。。。而我现在的PCR产物已经是290多bp大小了
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6楼2011-05-18 08:07:18
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
xwsooo(金币+1): 2011-05-17 20:52:55
难道出现酶切产物自连？！
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2楼2011-05-17 20:49:42
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xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-05-17 20:49:42:
难道出现酶切产物自连？！

请赐教？我发现几率大概1/3。。。
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3楼2011-05-17 20:51:08
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xwsooo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-05-17 20:49:42:
难道出现酶切产物自连？！

我做了三种PCR产物浓度，发现浓度最大的倒是切出合理的条带数目了（虽然在3%胶上与marker对比，与预计大小有些出入），浓度最小的是smear模糊了，中等浓度的就产生比PCR产物还大几十个bp 的片段，非常的不解~~·
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4楼2011-05-17 21:08:12
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