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银虫
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[交流]
酶切条带
很奇怪的一件事,酶切完电泳条带与PCR产物对比,多了一条大于PCR产物的条带??求解~~~
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2011-05-17 20:47:42
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Originally posted by
beautybanana
at 2011-05-19 18:11:23:
可能酶切位点不止一个,仔细核对下酶切位点的专一性~
是的,我在上面已经说啦,而且不止两个,除了SNP处的酶切位点之外,分别在在上下游引物结合靶序列处还各有一个相同的酶切位点。。。而我现在的PCR产物已经是290多bp大小了
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10楼
2011-05-20 08:59:25
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lxj341401
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖
xwsooo(金币+1): 2011-05-17 20:52:55
难道出现酶切产物自连?!
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2011-05-17 20:49:42
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Originally posted by
lxj341401
at 2011-05-17 20:49:42:
难道出现酶切产物自连?!
请赐教?我发现几率大概1/3。。。
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3楼
2011-05-17 20:51:08
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Originally posted by
lxj341401
at 2011-05-17 20:49:42:
难道出现酶切产物自连?!
我做了三种PCR产物浓度,发现浓度最大的倒是切出合理的条带数目了(虽然在3%胶上与marker对比,与预计大小有些出入),浓度最小的是smear模糊了,中等浓度的就产生比PCR产物还大几十个bp 的片段,非常的不解~~·
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4楼
2011-05-17 21:08:12
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