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xwsooo

银虫 (小有名气)


[交流] 酶切条带

很奇怪的一件事,酶切完电泳条带与PCR产物对比,多了一条大于PCR产物的条带??求解~~~
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xwsooo

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by beautybanana at 2011-05-19 18:11:23:
可能酶切位点不止一个,仔细核对下酶切位点的专一性~

是的,我在上面已经说啦,而且不止两个,除了SNP处的酶切位点之外,分别在在上下游引物结合靶序列处还各有一个相同的酶切位点。。。而我现在的PCR产物已经是290多bp大小了
10楼2011-05-20 08:59:25
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
xwsooo(金币+1): 2011-05-17 20:52:55
难道出现酶切产物自连?!
2楼2011-05-17 20:49:42
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xwsooo

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-05-17 20:49:42:
难道出现酶切产物自连?!

请赐教?我发现几率大概1/3。。。
3楼2011-05-17 20:51:08
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xwsooo

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-05-17 20:49:42:
难道出现酶切产物自连?!

我做了三种PCR产物浓度,发现浓度最大的倒是切出合理的条带数目了(虽然在3%胶上与marker对比,与预计大小有些出入),浓度最小的是smear模糊了,中等浓度的就产生比PCR产物还大几十个bp 的片段,非常的不解~~·
4楼2011-05-17 21:08:12
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