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墨池

银虫 (小有名气)

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[求助] 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，染色问题

1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银染色时，是不是要染到溴酚蓝指示剂带和二甲苯青指示剂带消失。
2 Marker条带很早就染出来了，但样品条带很慢，为了等样品条带染出来，就多染了几分钟，结果呢，Marker条带就染过分了，变得很黑。这个问题要怎么解决呢？（有图为证）

PS：谢谢大家对小女子的帮助，(*^__^*) 嘻嘻

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阳光暖暖的，心情暖暖的，努力做个精致的女人！

1楼 2011-05-17 10:13:16

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天空下的宝贝

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
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注册: 2014-07-27
专业: 电化学分析

引用回帖:

6楼: Originally posted by review at 2011-07-17 20:38:44
步骤没问题估计是操作过程

银染：1，将胶浸入固定液，于摇床中固定，直到胶上颜色脱去
2，蒸馏水洗胶2次（数秒），倒入染色液，于摇床中染色5-10分钟
3，蒸馏水洗胶2次（<20s），倒入显色液，于摇床中轻摇，至出现扩增条带，带清晰后加双氧水，凝胶停显。

固定液：50mL 乙醇，25mL冰醋酸，加水至500mL
银染液：20mL 10% 硝酸银，加水至1000mL
显色液：7.5g 氢氧化钠，5.4mL甲醛，加水至1000mL

谢谢O(∩_∩)O谢谢