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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，染色问题
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墨池

银虫 (小有名气)

[求助] 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，染色问题

1  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，硝酸银染色时，是不是要染到溴酚蓝指示剂带和二甲苯青指示剂带消失。
2   Marker条带很早就染出来了，但样品条带很慢，为了等样品条带染出来，就多染了几分钟，结果呢，Marker条带就染过分了，变得很黑。这个问题要怎么解决呢？（有图为证）


PS：谢谢大家对小女子的帮助，(*^__^*) 嘻嘻
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1楼 2011-05-17 10:13:16
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天空下的宝贝

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by review at 2011-07-17 20:38:44
步骤没问题  估计是操作过程

银染：1，将胶浸入固定液，于摇床中固定，直到胶上颜色脱去
         2，蒸馏水洗胶2次（数秒），倒入染色液，于摇床中染色5-10分钟
         3，蒸馏水洗胶2次（<20s），倒入显色液，于摇床中轻摇，至出现扩增条带，带清晰后加双氧水，凝胶停显。

固定液：50mL 乙醇，25mL冰醋酸，加水至500mL
银染液：20mL 10% 硝酸银，加水至1000mL
显色液：7.5g 氢氧化钠，5.4mL甲醛，加水至1000mL


谢谢O(∩_∩)O谢谢
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9楼2014-08-07 13:07:01
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xuguanghai

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

墨池(金币+1): 2011-05-17 19:11:47
1.大部分消失就可以了
2.时间控制吧
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2楼2011-05-17 10:29:07
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shaohuiwu007

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): 很热心！ 2011-05-17 16:50:31
墨池(金币+1): 2011-05-17 19:11:41
我看过你的银染的照片了，我觉得你照片好像不是很成功，你不介意的话，告诉我你的银染步骤，我帮你看看，我是做蛋白质方面的，印染也做过，染出的结果和你的不一样。
赞一下(1人) 回复此楼
知识属于整个人类，大家一起分享，共同促进人类的发展。
3楼2011-05-17 16:01:53
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shaohuiwu007

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

墨池(金币+1): 2011-05-17 19:11:54
你可以告诉我你邮箱，我发给你我的银染照片。
赞一下 回复此楼
知识属于整个人类，大家一起分享，共同促进人类的发展。
4楼2011-05-17 16:08:32
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