| 查看: 3631 | 回复: 7 | ||||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[交流]
自杀质粒
|
||||
|
一般用于基因突变。 将突变的目的基因克隆到自杀性质粒载体上，通过接合等使其进入宿主，由于在宿主菌中不存在复制基因启始所需的复制蛋白（如Pi蛋白等），其无法复制，在外界选择性压力的作用下,自杀性质粒载体所携带的突变基因就与宿主染色体上的野生型发生基因发生二次同源重组，产生了带有突变的突变株； 而质粒载体自身由于自杀性特性连同染色体上原有的野生型基因一起随着细菌的传代从菌体内消失。 至于一次重组的突变株，可借助质粒上的某些选择基因（如sacB，sucrose敏感）筛除。 这是“自杀质粒”的一些原理性的问题，根据以上我想到了，在用自杀质粒实现突变的过程中，会有以下几种中间产物的形成： 野生型毒株（需要突变的原始染色体） 一次同源重组的突变株 二次同源重组的突变株 质粒载体本身（随着自杀质粒本身的特性，而在宿主菌中消失） 同源重组后含有野生型基因组的重组质粒（也随着自杀质粒的特性，在宿主菌中消失） 我的问题是，野生型的毒株是如何消失的？第一次同源重组与第二次同源重组的原理是什么？ 谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
假如你的研究生提出不合理要求
已经有4人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有27人回复
-
所感
已经有3人回复
-
要不要辞职读博？
已经有7人回复
-
不自信的我
已经有11人回复
-
北核录用
已经有3人回复
-
实验室接单子
已经有3人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有8人回复
-
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有10人回复
-
26申博（荧光探针方向，有机合成）
已经有4人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
求一个访问学者邀请函，非常非常感谢
+1/677
-
中国科学院大学功能多孔组装材料实验室招聘启事
+2/328
-
双一流南京医科大学招计算机、AI、统计、生物信息等方向26年9月入学博士
+1/177
-
原子层沉积（ALD）磁控溅射PECVD等微纳代工服务：18817872921
+1/86
-
供应德国EXAKT艾卡特半导体导热散热材料三辊研磨机50 PLUS
+1/84
-
福建师范大学柔性电子学院招收2026年博士（储能材料与柔性电子器件）
+1/81
-
湖南科技大学资安学院管青军教授2026年招收审核制博士生
+1/73
-
真诚找对象
+1/67
-
深圳信息职业技术大学-博后招聘（优秀可留校）
+1/31
-
厦门大学航空航天学院智能制造课题组招2026年申请审核制博士生1-2名
+1/30
-
中科院理化技术研究所张飞龙研究员/王树涛研究员团队招生（博士/硕士）
+1/29
-
SCI，计算机相关可以写
+1/20
-
SCI，计算机相关可以写
+1/19
-
重庆医科大学-药学院-新靶标教育部医药基础研究创新中心-药物化学2026年博士招生
+1/7
-
中国科学院大学-杨晗课题组-诚聘-博士后、副研究员
+1/6
-
中科院（广州）研究团队招聘无机非金属材料方向特别研究助理或博后
+1/4
-
中科院动物所招收2026年博士生（优先少干专项计划、化学或生命科学背景）
+1/3
-
液晶拓扑光子学博士招生（电子科技大学）
+1/3
-
上海交通大学环境学院（环境化学与环境毒理学；大数据与人工智能）博士后招聘～
+1/3
-
土木、交通工程专业博士后站有吗？（无博士毕业3年要求+可接受兼职博后）
+1/1
2楼2011-05-16 14:35:15
3楼2011-05-16 15:41:26
4楼2011-05-16 15:42:07
5楼2011-05-16 16:31:19
6楼2011-05-17 13:38:31
天使托
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +57 - MicEPI: 13
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16382.3
- 帖子: 3648
- 在线: 288.2小时
- 虫号: 441757
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wolfebst(金币+3, EPI+1): 奖励一下 2011-05-18 15:34:50
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wolfebst(金币+3, EPI+1): 奖励一下 2011-05-18 15:34:50
|
野生型的毒株是如何消失的？ 答：这个要看你基因敲除是给基因中间插入的是什么片段了，如果是一段带有抗生素的片段，那么在筛选突变体的过程中我可以加入大量的该抗生素，导致野生型菌株死去，而带有抗生素片段的敲除基因（已经重组至染色体上）则会生存。 第一次同源重组与第二次同源重组的原理是什么？ 一次重组就是带有敲除基因的片段和正常基因的片段都在染色体上；而二次重组完全就是将目的基因敲除后整合至染色体上了，如果一般达到一次重组了，继续在抗生素的板子上筛选和进行PCR验证就可以最终得到突变体了！ |
7楼2011-05-18 15:27:30
8楼2012-01-13 14:35:49