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zhaoge_2005

金虫 (小有名气)

[交流] 做的数据结果与文献差太远

两个氨基酸同源性98%的基因，均在毕赤酵母中表达，为什么在产酶和比酶活的数据相差10倍以上？
是我的做法不好，还是数据造假？
求解有虫友有过类似的境况，望指点！
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1楼 2011-05-11 10:05:40
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
zhaoge_2005(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by zhaoge_2005 at 2011-05-11 10:05:40:
两个氨基酸同源性98%的基因，均在毕赤酵母中表达，为什么在产酶和比酶活的数据相差10倍以上？
是我的做法不好，还是数据造假？
求解有虫友有过类似的境况，望指点！

可以说详细些吗？比如你的结果是多少，文献的又是多少，等等。
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3楼2011-05-11 13:27:20
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
zhaoge_2005(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+4, EPI+1): Good！考虑很周到！ 2011-05-11 13:26:45
zhaoge_2005(金币+5): 谢谢 2011-05-12 10:45:51
zhaoge_2005(金币+5): 2011-06-17 10:29:59
引用回帖:
Originally posted by zhaoge_2005 at 2011-05-11 10:05:40:
两个氨基酸同源性98%的基因，均在毕赤酵母中表达，为什么在产酶和比酶活的数据相差10倍以上？
是我的做法不好，还是数据造假？
求解有虫友有过类似的境况，望指点！

两种情况皆有可能。但要先从自己做的方面去考虑，不能随便怀疑人家数据造假。
1、两个氨基酸同源性98%的基因并不能保证他们活性就差不多，有时候相差一个氨基酸活性就相差很多，这种情况很多的。2、即使基因完全一样，也都是在毕赤酵母中表达，但如果载体不一样，表达条件不一样，表达结果也相差很远的。3、还有基因的密码子问题，酵母也有密码子偏爱性的。
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2楼2011-05-11 10:55:25
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zhaoge_2005

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-05-11 13:27:20:
可以说详细些吗？比如你的结果是多少，文献的又是多少，等等。

我们两个只有一个AA不同，而且，都是有的pPICZαA表达载体，我的比酶活只有200出头，但是文献的有2500多呐。
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4楼2011-05-11 14:02:43
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)
★
zhaoge_2005(金币+1):谢谢参与
2楼说的很有道理！我赞同

另外，你的表达条件肯定也是影响酶活的关键因素
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5楼2011-05-11 17:20:12
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