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zhaoge_2005

金虫 (小有名气)


[交流] 做的数据结果与文献差太远

两个氨基酸同源性98%的基因,均在毕赤酵母中表达,为什么在产酶和比酶活的数据相差10倍以上?
是我的做法不好,还是数据造假?
求解有虫友有过类似的境况,望指点!
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zhaoge_2005(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+4, EPI+1): Good!考虑很周到! 2011-05-11 13:26:45
zhaoge_2005(金币+5): 谢谢 2011-05-12 10:45:51
zhaoge_2005(金币+5): 2011-06-17 10:29:59
引用回帖:
Originally posted by zhaoge_2005 at 2011-05-11 10:05:40:
两个氨基酸同源性98%的基因,均在毕赤酵母中表达,为什么在产酶和比酶活的数据相差10倍以上?
是我的做法不好,还是数据造假?
求解有虫友有过类似的境况,望指点!

两种情况皆有可能。但要先从自己做的方面去考虑,不能随便怀疑人家数据造假。
1、两个氨基酸同源性98%的基因并不能保证他们活性就差不多,有时候相差一个氨基酸活性就相差很多,这种情况很多的。2、即使基因完全一样,也都是在毕赤酵母中表达,但如果载体不一样,表达条件不一样,表达结果也相差很远的。3、还有基因的密码子问题,酵母也有密码子偏爱性的。
2楼2011-05-11 10:55:25
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zhaoge_2005(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by zhaoge_2005 at 2011-05-11 10:05:40:
两个氨基酸同源性98%的基因,均在毕赤酵母中表达,为什么在产酶和比酶活的数据相差10倍以上?
是我的做法不好,还是数据造假?
求解有虫友有过类似的境况,望指点!

可以说详细些吗?比如你的结果是多少,文献的又是多少,等等。
3楼2011-05-11 13:27:20
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zhaoge_2005

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-05-11 13:27:20:
可以说详细些吗?比如你的结果是多少,文献的又是多少,等等。

我们两个只有一个AA不同,而且,都是有的pPICZαA表达载体,我的比酶活只有200出头,但是文献的有2500多呐。
4楼2011-05-11 14:02:43
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)



zhaoge_2005(金币+1):谢谢参与
2楼说的很有道理!我赞同

另外,你的表达条件肯定也是影响酶活的关键因素
5楼2011-05-11 17:20:12
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