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汕头大学海洋科学接受调剂
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zhangxianqin

金虫 (小有名气)

[求助] 抑菌圈求助

我最近在做抗菌肽的抑菌试验,开始的时候都做出了清晰的圈,隔了段时间再做,现在只看见液体扩散的颜色圈,没有抑菌圈。我前后的试验方法步骤都是一样的。打开平板发现液体扩散的这个圈表面长了菌,味道与大肠杆菌有一定的区别。难道是因为我的抗菌肽里面有染菌了吗?
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五木凋零

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-05-11 22:37:50
rainwander(EPI+1): 2011-05-11 22:37:54
抗菌肽在做抑菌实验之前一定要用0.22um的膜过滤除菌,一般这样处理以后,可以在室温下放一段时间,我们实验室都是这么做的。
另外,大肠杆菌在培养12小时后就可以做抑菌实验了,培养时间太长了,就会导致指示菌浓度过高,而抗菌肽浓度过低了。很多时候,我们在做的时候,在非常清晰的抑菌圈的外围还会有一圈比较不清晰的圈,这个圈不作为抑菌效果来考虑。抑菌圈的重复性一般是很好的。
如果有可能再制备点样品吧。
你的抗菌肽是用什么溶解的?
7楼2011-05-11 22:24:00
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长汀

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhangxianqin(金币+1): 积极的虫子~ 2011-05-10 10:27:40
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-05-10 15:54:38
抑菌肽使用前经过初步的除菌处理了吧。
我感觉可能是活性问题,你可以尝试下将涂平板的菌浓度降低,同时提高抑菌肽使用的浓度,观察是不是有抑菌圈。
曾经做过一段类似试验,最后就是这样把抑菌圈做出来的,随机性太大……
我的职业理想是做过一些值得骄傲的事情,我不会一直干下去,但在离开前,我会留下一份成绩单。
2楼2011-05-10 10:21:04
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zhangxianqin

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 长汀 at 2011-05-10 10:21:04:
抑菌肽使用前经过初步的除菌处理了吧。
我感觉可能是活性问题,你可以尝试下将涂平板的菌浓度降低,同时提高抑菌肽使用的浓度,观察是不是有抑菌圈。
曾经做过一段类似试验,最后就是这样把抑菌圈做出来的,随机 ...

已经将抗菌肽的浓度升高了。而且菌的浓度还做了几个梯度,都没有出现抑菌圈,只是浓度高点的出现的带颜色的圈也要大些。我培养的时间是18个小时,应该也不算长呀!抗菌肽是放在实验室好久了,就担心是不是染菌了。
3楼2011-05-10 10:26:27
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若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-05-11 22:37:28
zhangxianqin(金币+1): 谢谢交流 2011-05-13 15:05:25
可以考虑用微孔滤膜对抗菌肽进行除菌处理,也有可能是你这抗菌肽时间太长的,会不会失活了?
没有比脚更长的路,没有比人更高的山
4楼2011-05-10 18:31:46
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