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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 抑菌圈求助
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zhangxianqin

金虫 (小有名气)

[求助] 抑菌圈求助

我最近在做抗菌肽的抑菌试验，开始的时候都做出了清晰的圈，隔了段时间再做，现在只看见液体扩散的颜色圈，没有抑菌圈。我前后的试验方法步骤都是一样的。打开平板发现液体扩散的这个圈表面长了菌，味道与大肠杆菌有一定的区别。难道是因为我的抗菌肽里面有染菌了吗？
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1楼 2011-05-10 10:15:35
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长汀

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhangxianqin(金币+1): 积极的虫子~ 2011-05-10 10:27:40
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-05-10 15:54:38
抑菌肽使用前经过初步的除菌处理了吧。
我感觉可能是活性问题，你可以尝试下将涂平板的菌浓度降低，同时提高抑菌肽使用的浓度，观察是不是有抑菌圈。
曾经做过一段类似试验，最后就是这样把抑菌圈做出来的，随机性太大……
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我的职业理想是做过一些值得骄傲的事情，我不会一直干下去，但在离开前，我会留下一份成绩单。
2楼2011-05-10 10:21:04
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zhangxianqin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 长汀 at 2011-05-10 10:21:04:
抑菌肽使用前经过初步的除菌处理了吧。
我感觉可能是活性问题，你可以尝试下将涂平板的菌浓度降低，同时提高抑菌肽使用的浓度，观察是不是有抑菌圈。
曾经做过一段类似试验，最后就是这样把抑菌圈做出来的，随机 ...

已经将抗菌肽的浓度升高了。而且菌的浓度还做了几个梯度，都没有出现抑菌圈，只是浓度高点的出现的带颜色的圈也要大些。我培养的时间是18个小时，应该也不算长呀！抗菌肽是放在实验室好久了，就担心是不是染菌了。
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3楼2011-05-10 10:26:27
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若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-05-11 22:37:28
zhangxianqin(金币+1): 谢谢交流 2011-05-13 15:05:25
可以考虑用微孔滤膜对抗菌肽进行除菌处理，也有可能是你这抗菌肽时间太长的，会不会失活了？
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没有比脚更长的路，没有比人更高的山
4楼2011-05-10 18:31:46
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-05-11 22:37:36
zhangxianqin(金币+1): 谢谢交流 2011-05-13 15:06:02
抗菌肽是抗某一类微生物。并不一定不会染菌。霉菌在很多抗菌肽溶液中都能生长
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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
5楼2011-05-10 19:23:43
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郝钊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by 若溪 at 2011-05-10 18:31:46:
可以考虑用微孔滤膜对抗菌肽进行除菌处理，也有可能是你这抗菌肽时间太长的，会不会失活了？

有道理，有重要参考价值
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6楼2011-05-11 00:19:19
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五木凋零

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-05-11 22:37:50
rainwander(EPI+1): 2011-05-11 22:37:54
抗菌肽在做抑菌实验之前一定要用0.22um的膜过滤除菌，一般这样处理以后，可以在室温下放一段时间，我们实验室都是这么做的。
另外，大肠杆菌在培养12小时后就可以做抑菌实验了，培养时间太长了，就会导致指示菌浓度过高，而抗菌肽浓度过低了。很多时候，我们在做的时候，在非常清晰的抑菌圈的外围还会有一圈比较不清晰的圈，这个圈不作为抑菌效果来考虑。抑菌圈的重复性一般是很好的。
如果有可能再制备点样品吧。
你的抗菌肽是用什么溶解的？
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7楼2011-05-11 22:24:00
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长汀

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zhangxianqin(金币+1): 谢谢交流 2011-05-13 15:07:03
wolfebst(金币+1): 鼓励 2011-05-13 23:20:21
嗯，我把我做的抑菌圈方法说一下吧。首先通过0.22微米微孔滤膜除菌，所以我问你是不是除菌了。其次是低浓度涂布平板，用牛津杯做的抑菌试验，将抑菌肽加入牛津杯后放入冰箱两个小时，这一点比较重要，我对比过，冰箱两小时效果更好。然后再培养，你可以尝试下。个人见解，祝好运
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我的职业理想是做过一些值得骄傲的事情，我不会一直干下去，但在离开前，我会留下一份成绩单。
8楼2011-05-12 16:43:56
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zhangxianqin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 五木凋零 at 2011-05-11 22:24:00:
抗菌肽在做抑菌实验之前一定要用0.22um的膜过滤除菌，一般这样处理以后，可以在室温下放一段时间，我们实验室都是这么做的。
另外，大肠杆菌在培养12小时后就可以做抑菌实验了，培养时间太长了，就会导致指示菌浓 ...

我的是用无菌水配制的~
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9楼2011-05-13 15:00:52
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zhangxianqin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 长汀 at 2011-05-12 16:43:56:
嗯，我把我做的抑菌圈方法说一下吧。首先通过0.22微米微孔滤膜除菌，所以我问你是不是除菌了。其次是低浓度涂布平板，用牛津杯做的抑菌试验，将抑菌肽加入牛津杯后放入冰箱两个小时，这一点比较重要，我对比过，冰 ...

谢谢！我可以尝试下你的方法！
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10楼2011-05-13 15:02:03
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