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iamliwei428

新虫 (正式写手)

[求助] 过柱子时展开剂的选择

我用丙酮：水：乙酸=20:1:0.5的比例进行薄层层析，结果发现可以分为四个点，Rf值分别为0.1,0.4,0.6，0.9.可是我用同样的比例进行柱层析洗脱时，产物在前几管就完全出来，没有起到任何分离效果，请大家分析一下原因。
郁闷中。。。。
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1楼2011-05-05 22:08:21
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iamliwei428

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by kaizhixin at 2011-05-06 00:28:01:
柱子不是这样过的，哪有直接用展开剂做洗脱剂的呢，极性最好调小十倍左右，用甲醇二氯试一试，要保证酸环境的话，加上千分之一左右的乙酸试试，总之过柱子极性不能太大了

我试过很多展开剂，都不能在薄层中分开，那样的话，可以洗脱成功吗？其他比例不是跑不开就是拖尾很严重，请指教。
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3楼2011-05-06 07:58:00
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kaizhixin

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

iamliwei428(金币+2, 博学EPI+1): 2011-05-06 07:54:22
柱子不是这样过的，哪有直接用展开剂做洗脱剂的呢，极性最好调小十倍左右，用甲醇二氯试一试，要保证酸环境的话，加上千分之一左右的乙酸试试，总之过柱子极性不能太大了
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活着，就是为了更好的活着！
2楼2011-05-06 00:28:01
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kaizhixin

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by iamliwei428 at 2011-05-06 07:58:00:
我试过很多展开剂，都不能在薄层中分开，那样的话，可以洗脱成功吗？其他比例不是跑不开就是拖尾很严重，请指教。

板层析中，只要是极性配比好就可以了，拖尾问题主要还是和酸碱性有关，你要做柱层析，洗脱剂的极性必须调小些，要不就很容易全部洗脱出来，达不到分离效果，如果对产品纯度要求很高的话，过柱子同时用TLC和HPLC检测，收集产品点就行，要是你的粗品量很小，最好用制备液相分离效果会好点！
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活着，就是为了更好的活着！
4楼2011-05-06 13:06:33
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