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iamliwei428

新虫 (正式写手)

[求助] 过柱子时展开剂的选择

我用丙酮:水:乙酸=20:1:0.5的比例进行薄层层析,结果发现可以分为四个点,Rf值分别为0.1,0.4,0.6,0.9.可是我用同样的比例进行柱层析洗脱时,产物在前几管就完全出来,没有起到任何分离效果,请大家分析一下原因。
郁闷中。。。。

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kaizhixin

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

iamliwei428(金币+2, 博学EPI+1): 2011-05-06 07:54:22
柱子不是这样过的,哪有直接用展开剂做洗脱剂的呢,极性最好调小十倍左右,用甲醇二氯试一试,要保证酸环境的话,加上千分之一左右的乙酸试试,总之过柱子极性不能太大了
活着,就是为了更好的活着!
2楼2011-05-06 00:28:01
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iamliwei428

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by kaizhixin at 2011-05-06 00:28:01:
柱子不是这样过的,哪有直接用展开剂做洗脱剂的呢,极性最好调小十倍左右,用甲醇二氯试一试,要保证酸环境的话,加上千分之一左右的乙酸试试,总之过柱子极性不能太大了

我试过很多展开剂,都不能在薄层中分开,那样的话,可以洗脱成功吗?其他比例不是跑不开就是拖尾很严重,请指教。
3楼2011-05-06 07:58:00
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kaizhixin

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by iamliwei428 at 2011-05-06 07:58:00:
我试过很多展开剂,都不能在薄层中分开,那样的话,可以洗脱成功吗?其他比例不是跑不开就是拖尾很严重,请指教。

板层析中,只要是极性配比好就可以了,拖尾问题主要还是和酸碱性有关,你要做柱层析,洗脱剂的极性必须调小些,要不就很容易全部洗脱出来,达不到分离效果,如果对产品纯度要求很高的话,过柱子同时用TLC和HPLC检测,收集产品点就行,要是你的粗品量很小,最好用制备液相分离效果会好点!
活着,就是为了更好的活着!
4楼2011-05-06 13:06:33
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