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咸鱼

金虫 (小有名气)

[交流] 抗体

我们实验室之前一直用sigma的anti-flag，很好用，但是用完后新买的抗体刚开始还好，用了两次之后就发现不好用了，就是每次在120-130之间都能杂出来一条非特异的带。所以我想问下大家都用哪个公司的anti-Flag抗体，好用么？            谢谢大家参与交流 O(∩_∩)O~
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1楼 2011-05-05 10:41:48
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+4): Good 2011-05-05 12:38:07
咸鱼(金币+1): 谢谢~ 2011-05-08 19:43:53
新抗体开始用两次还好，再用就有非特异条带了？这个问题值得分析一下，是否确定是抗体原因呢？ 一般抗体要是不反复冻融，是不会出现变质问题的。非特异条带，抗原的原因值得怀疑，一抗条件是否优化了？
另外Flag这样的标签抗体，应该很好买的，估计随便哪个公司的都能凑合用，
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3楼2011-05-05 11:33:55
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shenhaiwang

金虫 (小有名气)
咸鱼(金币+1): 谢谢~ 2011-05-08 19:43:35
我们实验室用的不是sigma公司的，好像有好几家公司的，效果还不错。应该各家公司的都差不多吧，实在不行就再买一次了。。。
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2楼2011-05-05 11:28:46
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咸鱼

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 314300420 at 2011-05-05 11:33:55:
新抗体开始用两次还好，再用就有非特异条带了？这个问题值得分析一下，是否确定是抗体原因呢？ 一般抗体要是不反复冻融，是不会出现变质问题的。非特异条带，抗原的原因值得怀疑，一抗条件是否优化了？
另外Fl ...

前两次用还好是因为前两次做的蛋白条带比较小，上面的切掉了，没注意。后来做的蛋白比较大就发现不特异了。
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4楼2011-05-05 18:11:49
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咸鱼

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 314300420 at 2011-05-05 11:33:55:
新抗体开始用两次还好，再用就有非特异条带了？这个问题值得分析一下，是否确定是抗体原因呢？ 一般抗体要是不反复冻融，是不会出现变质问题的。非特异条带，抗原的原因值得怀疑，一抗条件是否优化了？
另外Fl ...

不想凑合用，因为我是做coIP，不是简单的Western，coIP都能co到非特异条带，那抗体肯定是有问题~
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5楼2011-05-05 18:12:55
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