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花的泪

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 是的 2011-05-04 17:48:17
胶不凝，一般就是AP 或者TEMED出现问题，建议重新购买AP ，配置后4°保存不超过一周，TEMED 也建议买新的，都很便宜的东西，实验进行下去才是关键，不要在这些细节上纠结。
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11楼2011-05-04 15:31:19
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我和我自己

铁虫 (小有名气)
温度低了胶会凝固的慢……AP和TEMED的量绝对够了……
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12楼2011-05-04 15:54:38
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BigPlum

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励交流 2011-05-05 18:20:41
TEMED和APS很可能的一个问题。温度问题的话，可以试试配好后，放到37℃恒温培养箱里面试试，但是要保证恒温培养箱温度均匀，否则会导致局部胶浓度过高。不过，这都夏天了，应该不是温度问题，还是重配下APS和TEMED。APS还好吧，我最近配的APS，放在冰箱冷藏，能用1个礼拜啊。是不是你的APS本来就坏了？
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13楼2011-05-04 19:31:01
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cyq880205

金虫 (小有名气)
谢谢大家了，重新买了一瓶AP，终于凝了，是以前那一整瓶都失效了
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14楼2011-05-05 11:38:11
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BigPlum

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cyq880205 at 2011-05-05 11:38:11:
谢谢大家了，重新买了一瓶AP，终于凝了，是以前那一整瓶都失效了

特别能理解那种实验总做不成功的的心理，恭喜楼主，加油
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15楼2011-05-05 19:12:47
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poog502

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

按下面的顺序配制聚丙烯酰胺凝胶（Arc：Bis =29:1）（20ml，12%）；
水(或10-13%甘油)        6.6ml
30%丙烯酰胺溶液        8ml
1.5M Tris（pH8.8）        5ml
10% SDS        200μL
10% 过硫酸铵        200μL
TEMED        15μL
(3) 混匀，灌胶；
(4) 在凝胶液面上小心加水覆盖，以使界面平滑。
(5) 等凝固后再配制浓缩胶（5ml，5%）；
水(或10-13%甘油)        3.4ml
30%丙烯酰胺溶液        850μL
1M Tris（pH6.8）        675μL
10% SDS        50μL
10% 过硫酸铵        50μL
TEMED                              5μL
刚做完的实验，很清晰的图片
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16楼2011-05-05 20:43:07
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btx362237729

金虫 (正式写手)
肯定是试剂出问题了
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人生最黑暗的时光终于过去了
17楼2011-07-30 13:43:50
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
你APS是如何保存的？？？
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18楼2011-07-31 10:34:00
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