【答案】应助回帖

11楼2011-05-04 15:31:19

我和我自己

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温度低了胶会凝固的慢……AP和TEMED的量绝对够了……

12楼2011-05-04 15:54:38

BigPlum

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励交流 2011-05-05 18:20:41

TEMED和APS很可能的一个问题。温度问题的话，可以试试配好后，放到37℃恒温培养箱里面试试，但是要保证恒温培养箱温度均匀，否则会导致局部胶浓度过高。不过，这都夏天了，应该不是温度问题，还是重配下APS和TEMED。APS还好吧，我最近配的APS，放在冰箱冷藏，能用1个礼拜啊。是不是你的APS本来就坏了？

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13楼2011-05-04 19:31:01

cyq880205

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谢谢大家了，重新买了一瓶AP，终于凝了，是以前那一整瓶都失效了

14楼2011-05-05 11:38:11

BigPlum

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引用回帖:

Originally posted by cyq880205 at 2011-05-05 11:38:11:
谢谢大家了，重新买了一瓶AP，终于凝了，是以前那一整瓶都失效了

特别能理解那种实验总做不成功的的心理，恭喜楼主，加油

15楼2011-05-05 19:12:47

poog502

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【答案】应助回帖

按下面的顺序配制聚丙烯酰胺凝胶（Arc：Bis =29:1）（20ml，12%）；
水(或10-13%甘油) 6.6ml
30%丙烯酰胺溶液 8ml
1.5M Tris（pH8.8） 5ml
10% SDS 200μL
10% 过硫酸铵 200μL
TEMED 15μL
(3) 混匀，灌胶；
(4) 在凝胶液面上小心加水覆盖，以使界面平滑。
(5) 等凝固后再配制浓缩胶（5ml，5%）；
水(或10-13%甘油) 3.4ml
30%丙烯酰胺溶液 850μL
1M Tris（pH6.8） 675μL
10% SDS 50μL
10% 过硫酸铵 50μL
TEMED 5μL
刚做完的实验，很清晰的图片

16楼2011-05-05 20:43:07