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saint511木虫 (正式写手)
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[求助]
请教关于透析袋及其使用
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因实验需要，要使用透析带（不是透析袋），因为很贵，想问一下， 透析带一般能重复使用几次？使用前后的处理方法？ 另外，网络上有提到透析袋和透析膜两种，好像前处理方法不同，想问一下这两种透析用品有什么差别？ 另外能否推荐一些透析袋厂商？最好分子量在1000-2500左右的，性价比高一点的吧。 |
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8楼2011-05-02 21:38:14
【答案】应助回帖
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透析袋的处理 分子在半透膜间的分离是由膜两侧溶液的浓度差驱动的，受相对于膜内微孔尺寸的分子大小(分子质量)的限制。微孔尺寸决定着截留分子质量，截留分子质量的定义是当90%的溶质分子可被膜截留时的分子质量。实际某一溶质的通透性不仅取决于分子的大小，还取决于分子的形状、分子的水化程度及其所带的电荷。这些参数均受溶剂的性质、pH以及离子强度的影响。因此截留分子质量只能作为参考，而不能绝对地用来预测在各种溶质和溶剂下的透析行为。市售的透析膜孔径范围很大(从100Da到2 000kDa)。在透析大多数质粒DNA和许多蛋白质时，截留分子质量在12000～14000Da之间比较适合。 (1)将透析管剪成适当长度(10～20cm)的小段，即形成透析袋。 (2)在大体积的2%(m/v)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10 min。 (3)将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。 (4)将透析袋置1 mmol/L EDTA(pH 8.0)中煮沸10min。 (5)待透析袋冷却，存放于4℃，应确保透析袋始终浸没在液体中。 重要：从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。 (6)在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。 [注]也可将透析袋放在广口瓶中充满水，松动瓶盖，于20psi(1.40 kg/cm2)高压灭菌10min代替第4步用1 mmol/L EDTA(pH8.0)煮沸10min的操作。 使用完后将透析袋浸泡在70％乙醇中以免长菌。 |
9楼2011-05-03 14:55:48
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10楼2011-05-03 15:35:06
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