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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于透析袋的问题
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louisena

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于透析袋的问题 已有3人参与

请教各位关于透析袋的问题，用MWCO500的透析分子量1100的物质，但是透析一天后通过TLC薄板检测，发现无法测出物质，原因在哪？
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1楼 2011-02-28 09:30:44
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3): 感谢交流 2011-02-28 14:02:31
引用回帖:
Originally posted by louisena at 2011-02-28 09:30:44:
请教各位关于透析袋的问题，用MWCO500的透析分子量1100的物质，但是透析一天后通过TLC薄板检测，发现无法测出物质，原因在哪？

透析存在如下问题：
a 透析袋的选择，透析袋的截留量是一个理论值，透析袋的孔洞有大有小，给出的数值是一个平均值。在透析时一般选取的透析袋不超过目的分子大小的 1/3，超过之后损失量可能就比较多，导致最后检测不到。

b 透析buffer的离子浓度往往比较低，而透析袋内的溶液离子浓度高。根据等渗原理，在透析结束的时候，目标物往往被稀释了。所以在透析结束后，目的物的浓度很有可能降低到检测限以下了，尤其是检测手段不是很灵敏的情况下。这种情况下，只需将透析袋内的东东浓缩一下就OK了。

c 目的物降解，这种情况大多出现在透析蛋白时不加蛋白酶抑制剂导致目的物被蛋白酶降解。你的透析物有没有可能跟其他物质反应，或者被环境中存在的酶当做底物利用掉？
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-02-28 13:37:54
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luquan5918

至尊木虫 (著名写手)
太感谢楼主了
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3楼2011-02-28 15:13:41
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louisena

金虫 (小有名气)
лл
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4楼2011-03-02 19:47:07
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