| 查看: 847 | 回复: 1 | ||
[求助]
HPLC测定样品 出现问题了？怎么办？？
|
|
EDTA铁的液相检测问题 采用液相检测EDTA铁，保留时间不稳定，第一天6.6分，第二天10分，第三天3分，第四天10分 保留时间跟我玩起来捉迷藏有戏，请大家多多指教。以下是详细内容。 柱子 Agilent XDB C8 流动相：40%四丁基氢氧化铵溶液3.25ml加水130ml，再用8.8%甲酸溶液调PH至3.30，加甲醇125ml，再用水稀释至1000ml ，此时PH约为3.50 液相条件 波长254nm ，流速1.0ml/min进样量20 EDTA铁浓度0.1mg/ML 第一天：保留时间6.6 分，没在意 第二天：使用前一天流动相、柱子，保留时间跑到10分，以为是EDTA铁在新使用的柱子上有一定饱和时限，所以勉强解释了一下，希望以后会稳定。继续试验 第三天：新换流动相，柱子未换，保留时间跑到3分，以为甲醇加多了或者试剂的问题，狂配流动相，连续更换3次流动相，样品保留时间均在3分。 放弃，无语了。 第四天：死马当活马医，继续用前一天的柱子，流动相，前一天的样品，保留时间重新回到了10分。 以上样品在四天检测当中，峰形和峰面积没有明显变化。 分析以上：排除了流动相、样品、柱子、仪器的因素，实在找不出原因了。还怀疑是流动相的PH导致样品不稳定，后来查询了EDTA铁的PKA在pKPK1=0.0 (CO2H) pK2=1.5 (CO2H) pK3=2.00 (CO2H) pK4=2.69 (CO2H) pK5=6.13 (NH+) pK6=10.37 (NH+) 来自维基百科 EDTA铁为二元酸 PKA为2.00 依据此 在PH3.5 是稳定的 为什么呢？ 不过从目前来看，好像是流动相PH的原因啊 [ Last edited by laoyisng1122 on 2011-4-29 at 10:45 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
听说今天filecode变了
已经有30人回复
-
filecode
已经有14人回复
-
固定端突然变了，今天
已经有7人回复
-
filecode
已经有11人回复
-
大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑
已经有6人回复
-
基金中了
已经有4人回复
-
一个有机合成实验室都需要哪些设备？
已经有12人回复
-
求各位大神看下
已经有33人回复
-
咨询面上基金
已经有7人回复
-
影响面上的因素
已经有11人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- HPLC分析样品 峰面积出现问题了。怎么解决？？
已经有6人回复
- 请教：HPLC分析样品 发现问题了。
已经有6人回复
- HPLC样品分析遇到问题了，不知道怎么办？？
已经有4人回复
- HPLC样品分析 发现问题了。不知道要怎么办了。。。
已经有4人回复
- HPLC二极管阵列检测器如何扫描样品的最大吸收波长？
已经有9人回复
- 液相样品分离出现问题了。怎么解决？？
已经有5人回复
- HPLC样品检测有倒峰是怎么回事？？
已经有11人回复
- 【求助】HPLC测定样品问题，请教！！
已经有11人回复
- 【求助】HPLC 检测样品一些问题，请教大家！
已经有8人回复
- 【求助】HPLC分析样品时的问题
已经有7人回复
- 【讨论】HPLC样品处理
已经有22人回复
2楼2011-05-03 14:51:46
50