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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hflf

金虫 (小有名气)

[交流] ELIAS原理 已有1人参与

各位好,最近开始做ELISA方面的实验,我学习了下ELISA的原理,看见所谓的夹心法和间接法,感觉有点迷糊,这所谓的两种方法,在我看来试验步骤完全相同,不过是最后加的东西的名称不一样而已,所谓的间接法我感觉挺直接的啊,他怎么就间接了呢?不就是酶标的抗人免疫球蛋白抗体与受检抗体结合了,不就是直接结合了么,怎么就间接了呢?
和同学讨论了这些问题,他们说我理解能力太差(也可能是吧),但是又说不出所以然,而我还是固执己见,望哪位也给我解释一下啊!
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行到水穷处,坐看云起时!
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
至于夹心法,只是一种习惯说法。可以去找一些ELISA format的示意图看看就了解了
3楼2011-04-28 12:44:08
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
从我接触到得常规ELISA来说,ELISA就是检测2种分子结合,先固定一种物质A,再加另外一种物质B去结合,
比如,直接法就是直接固定A,间接法就是通过固定其他与A特异结合的物质C来捕获A,再用B去和A结合,
因为直接固定A,可能会影响到A的活性或表位。
至于结合之后用什么试剂去检测,与直接法或间接法的定义是无关的。
2楼2011-04-28 12:39:11
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hflf

金虫 (小有名气)

间接法也是直接固定A,然后用B去结合啊,最后用的是抗抗体来检测与A结合的B的啊,这不也是直接法么,不就是抗抗体与B结合了然后显色的啊?结构也是固相-A-B-抗抗体,这不就是直接法么?
行到水穷处,坐看云起时!
4楼2011-04-28 14:15:25
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hflf

金虫 (小有名气)

这不是很直接么?刚还看了ELISA的反应图示,直接法或是间接法,都是这样的结合图示啊:固相-A-待检测B-酶联物,怎么就间接了呢?
行到水穷处,坐看云起时!
5楼2011-04-28 14:21:03
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