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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶标仪检测的OD值在多少最准
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pingdiguo

金虫 (小有名气)

[交流] 酶标仪检测的OD值在多少最准 已有9人参与

请教一下大家，酶标仪检测的OD值在多少最准确？一般大家都选什么值进行试验？谢谢~~
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1楼 2011-04-27 08:03:01
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pingdiguo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-04-30 16:45:44:
楼主要测什么东西，用什么方法测，都会影响有效范围。

ELISA试验，450nm处，以前都选择OD为1.0左右的条件。有同学说酶标仪最准确的范围在1.0~1.5？说选1.5左右处效果更好？表示怀疑~~~
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You never know how strong you really are, until being strong is the only choice you have.
7楼2011-04-30 22:05:40
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小小_木虫

木虫 (小有名气)
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amisking(金币+1): 鼓励发帖应助。 2011-04-27 20:59:22
酶标仪也是紫外光谱，紫外的有效测定范围0.1~1.0，超出此范围后虽然可以显示值，但是不是呈线性了，就不准确了。测时如果值超出1，就应该稀释，用原来的溶剂稀释即可。
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2楼2011-04-27 14:39:21
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小小_木虫

木虫 (小有名气)
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lstt09nk(金币+5): 热心奖 2011-05-04 17:48:48
今天看到一个帖子，也是关于酶标仪检测OD值的，觉的人家帖子不错，特意引用过来：

MTT方法的吸收度在0.2～0.8之间误差较小。这和分析化学中的ｌａｍｂｅｒｔ-beer定律有关， 对朗伯-比尔定律的偏离在吸光光度分析中，经常出现标准曲线不呈直线的情况，特别是当吸光物质浓度较高时，明显地看到通过原点向浓度轴弯曲的现象（吸光度轴弯曲)。这种情况称为偏离朗伯-比尔定律。若在曲线弯曲部分进行定量，将会引起较大的误差。在吸光光度分析中，仪器测量不准确也是误差的主要来源。任何光度计都有一定的测量误差
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4楼2011-04-29 09:18:34
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tonyprague1967

银虫 (正式写手)
★
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波长选择、还有检测方法很重要。MTT的最佳波长是570nm，但是很多文章发表检测的是490和620，这个就有差别。570是甲赞的峰值吸收，是最可信的。另外，有人用单波长法，有人用双波长法，这个需要根据你实验的操作习惯来具体修正。
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淡定……
5楼2011-04-30 09:32:54
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