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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 实验中的不解……
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liuzhaoxia

金虫 (正式写手)

[交流] 实验中的不解……

称取1g材料于研砵中，加5ml 1%的醋酸研碎，摇动5min，混匀，5000xg离心10min，沉淀再用1%醋酸洗三次，然后分别加5ml丙酮浸洗三次，5000Xg离心10min，70℃下烘至恒重。

请问，离心后的沉淀用醋酸，丙酮去冲洗这一步怎么理解，如果只是简单的浸洗就只能处理到沉淀的表面，效果不明显，不能将实验材料脱色。是不是将溶液加进去，混匀，再离心取沉淀？因为如果脱色不明显的话，影响到后面的吸光值测定。
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1楼 2011-04-25 17:11:11
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小损样儿

铁杆木虫 (职业作家)
★
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liuzhaoxia(金币+1): 2011-04-26 08:12:17
引用回帖:
Originally posted by liuzhaoxia at 2011-04-25 17:11:11:
称取1g材料于研砵中，加5ml 1%的醋酸研碎，摇动5min，混匀，5000xg离心10min，沉淀再用1%醋酸洗三次，然后分别加5ml丙酮浸洗三次，5000Xg离心10min，70℃下烘至恒重。

请问，离心后的沉淀用醋酸，丙酮去冲洗这 ...

什么实验材料？醋酸貌似起到了组织破坏的作用，丙酮应该是提取液。你告诉我实验材料，我好具体分析一下哈。
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4楼2011-04-25 22:18:50
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springmyqing

铁虫 (小有名气)
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liuzhaoxia(金币+1): 2011-04-26 08:12:09
我想用醋酸洗是要除去些碱性沉淀物质，让它变成盐溶于水，过滤掉。最后用丙酮洗，是出沉淀里的水和色素等可溶于丙酮的物质，最后得到的是丙酮粉，即粗蛋白质粉。做蛋白的分离纯化时可以用到的
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5楼2011-04-25 23:26:19
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liuzhaoxia

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by springmyqing at 2011-04-25 23:26:19:
我想用醋酸洗是要除去些碱性沉淀物质，让它变成盐溶于水，过滤掉。最后用丙酮洗，是出沉淀里的水和色素等可溶于丙酮的物质，最后得到的是丙酮粉，即粗蛋白质粉。做蛋白的分离纯化时可以用到的

原理是这样……我的意思是说方法中的冲洗，是直接将溶液加到离心管中晃一下吗？不需要再将沉淀混匀离心吗？
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6楼2011-04-26 08:15:05
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anyluk

主管区长 (文坛精英)
★
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引用回帖:
Originally posted by liuzhaoxia at 2011-04-25 15:44:53:

这个，不能完全按照文献上的做呀
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7楼2011-04-26 08:46:22
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ql229

木虫 (小有名气)
★
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应该是将醋酸加入到沉淀以后混匀，然后离心
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8楼2011-04-26 12:41:46
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springmyqing

铁虫 (小有名气)
★
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9楼2011-04-26 23:11:35
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anyluk2楼
2011-04-25 17:13   回复  
liuzhaoxia3楼
2011-04-25 20:44   回复  
引用回帖:
Originally posted by anyluk at 2011-04-25 17:13:44:

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