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欢仔

银虫 (正式写手)

[求助] HPLC-DAD

哪位大侠知道HPLC-DAD的原理,这是什么方法,怎么用,一般用在哪里
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勇于尝试新鲜事物
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leecius

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
novus(金币+2): 说的很详细,希望正是楼主所需! 2011-05-07 21:03:12
欢仔(金币+3): 谢谢 2011-05-15 12:53:57
楼主想问的应该是紫外单波长检测器(VWD)与紫外二极管阵列检测器(DAD)的使用及区别吧,本人略懂皮毛,简单说一说吧。
1.VWD和DAD两种检测器都属于高效液相色谱仪器的组成部分,只是两者设计有区别,使用有差异而已;
2.VWD只能进行某一特定波长的检测,即事先设定好某一波长,然后在此波长下对流经色谱柱的样品进行检测;DAD检测器可以进行全波长检测,一般是从190nm到400nm的范围扫描,扫描结束后得到一张三维图谱,坐标分别是运行时间、吸收值和波长值,当然你也可以从中调出任何一张波长范围在190nm到400nm的色谱图,此三维图对有关物质检查时的波长选择比较有帮助;
3.关于峰纯度的问题,在DAD检测器上,检查某一色谱峰(A)的峰纯度,首先要对A进行恰当的积分,然后选择合适的参比(分自动和手动,一般选自动,特殊情况下选手动),再选择波长范围(210nm-400nm较合适吧,再低会有基质的末端吸收干扰,会影响峰纯度检查的可信度,当然这要看具体的流动相及等梯度情况啦),之后选择固定阈值(国家局要求在990及以上),最后点一下要测的主峰就可以了。我简单的说一下峰纯度检查的原理吧,是这样的,当要检查某一色谱峰的峰纯度(A)时,软件会在A的起始点、前半中点、顶点、后半中点和结束点(共5点)分别取紫外全扫描图来进行拟合度检查,当拟合度大于阈值(即上述的990)时,软件默认为A的五个点都是一种物质,即A是一种物质的紫外吸收峰,纯的,相反,当拟合度低于阈值时,软件默认A的五个点不是一种物质,即A是两种或两种以上的物质的紫外吸收峰,不纯,就要再进行条件的优化分开它们了。所以峰纯度检查是选择有关物质检查色谱条件的重要环节之一,也就是方法的专属性啦。

上面啰嗦了这么多,希望对大家有帮助吧,如果有不到的地方,希望大家指出更正,谢谢啦!
心似白云常自在,意如流水任东西。
7楼2011-05-07 14:59:48
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普通回帖

aiyixiang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
novus(金币+1): 谢谢指教,欢迎常来药学版! 2011-05-07 21:01:22
novus(金币+1): 谢谢指教,欢迎常来药学版! 2011-05-07 21:03:19
DAD 即为二极管阵列检测器,原理同UV检测器,DAD检测器能够进行全波长扫描、检测峰纯度等,常用于建立有关物质的分析方法时筛选检测波长。
2楼2011-04-24 22:41:37
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欢仔

银虫 (正式写手)

它的使用与高效液相的有什么区别没
勇于尝试新鲜事物
3楼2011-04-24 23:44:34
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cj22xmc

新虫 (正式写手)

具体怎么检测峰纯度啊,请多赐教
mc
4楼2011-04-25 08:06:35
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

纯度角小于纯度阈值,默认的这个峰就是纯的(里边没有其他的峰包含着!)
具体的就不是很清楚了,期待高手的回帖。
学无止境
5楼2011-04-25 09:29:39
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欢仔

银虫 (正式写手)

勇于尝试新鲜事物
6楼2011-05-07 11:36:41
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zpv2011

银虫 (正式写手)

8楼2011-05-07 16:22:01
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shangxiaona

新虫 (小有名气)


novus(金币+1): DAD是可以同时采集190~400nm所有波长数据的,不必在不同时间点单独变化采集波长,当然如果想这样编梯度波长在工作站里也是可以实现的。 2011-05-10 22:02:01
我也想问一个问题,DAD检测器可以设置不同的时间段下不同的波长吗,例如:0min——254nm;20min——300nm这种情况
9楼2011-05-07 22:59:45
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shangxiaona

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

那在工作站里面怎样编辑梯度波长?我在事件里面编辑过,但没用2D通道,只得到全波长扫描的图,用的是waters 2998检测器,非常感谢
10楼2011-05-11 19:14:20
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