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大家帮忙分析一下PCR电泳图
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提鳗鱼总ＲＮＡ后直接ＲＴ，接下来的PCR电泳结果如图。 我要的条带在３３０ｂｐ。可基本是非特异性条带。 我做的是小清蛋白克隆，以前克隆其他鱼的时候也是用同样的引物，以前没这种情况出现，有没有可能是引物降解了？  |
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【答案】应助回帖
piggpi(金币+2): 2011-04-25 11:21:18
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其实迁移率并不是很重要对于你的实验来说，但是你问了这个问题，我就找了找答案：DNA电泳的迁移率跟一下几个因素有关：DNA的分子大小及构型：不同构型DNA的移动速度次序为：供价闭环DNA（covalently closed circular，cccDNA）>直线DNA>开环的双链环状DNA。 琼脂糖浓度，这个你知道的吧； 电源电压，不要把电压加的太大； 然后就是你关心的荧光染料溴化乙啶了，用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA，使其刚性更强,还会使线状DNA迁移率降低15％。不过个人认为这个影响真的没什么的，甚至可以忽略。 还有离子强度影响。 我说的那个没有模板的空白对照，就是说没有任何其他RNA或DNA的加入的空白对照，呵呵~ |
12楼2011-04-25 10:05:39
yuxia82012
木虫 (著名写手)
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2楼2011-04-20 16:20:52
西瓜
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3楼2011-04-20 17:17:16
4楼2011-04-20 18:40:35