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请教MTT和trypan blue方法进行细胞毒性诱因的判断(送20金币)
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借宝地移以用，有问题pm我，立即更改！！谢谢版主！！ MTT和trypan blue方法进行细胞毒性诱因的判断(送20金币) 应助supporter金币双倍奖励 Supporter求助：MTT和trypan blue方法进行细胞毒性诱因的判断 领金币处和帖子地址： http://muchong.com/bbs/viewthread. ... d=P4mf1m#pid2195850 用MTT法进行了细胞毒性的研究，结果以IC50值表示。 在同样条件下用trypan blue 的方法进行了细胞毒性研究对mmt方法进行补充，结果同样以IC50值表示。 能否通过以上两种方法判断此药物对目标细胞粒的细胞毒性源自于growth arrest 还是 necrosis。如果可以应该怎么通过数值结果进行判断，比如两种方法得到的ic50差别不大或相差很大，那么细胞毒性的诱因是上述那种！并且这种方法可靠吗？能否分别予两种细胞毒性诱因 growth arrest 和 necrosis 反应在MTT和胎盘蓝实验结果上的不同！ 谢谢！若有相关文献希望提供！！ 越详细越好，希望做过的虫子发表意见，网上的搜索资料我也做过，只是有些不懂希望生物医学的虫子帮忙！ Email：emuchsupporter@163.com |
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3楼2006-09-11 21:37:26
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whxhxq(金币+1):谢谢！
whxhxq(金币+1):谢谢！
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MTT是利用,活细胞内 线粒体脱氢酶能将四氮唑化物（MTT）由黄色还原为兰色的甲肷,然后来看是不是细胞是活的. 而台盼蓝,是可以穿透死细胞的膜,所以能够染死细胞. 所以,这个两个方法都是区分死细胞和活细胞,至于细胞怎么死的,这两种方法并不能有太大说服力. lZ似乎是要区分到底是生长抑制细胞,还是让细胞坏死(necrosis) 其实这个似乎可以从形态学上来区分,生长抑制的话,细胞一般都长不大,但是不一定死去. 而Necrosis的话,会有很多特征,比如细胞膜崩解,等等. 甚至,是药物诱导的调亡都有可能. 如果要区别药物诱导的调亡和Necrosis就很简单了. 各种方法都有. 所以,你要区分是什么细胞毒性,可能要借助别的方法. 而且,一般药物的细胞毒性,似乎不是诱导细胞调亡就是坏死. 当然也有你说的生长抑制,如果是这样,那就很可能是不是阻断了一些代谢途径等等. 随便说说,欢迎讨论. |
2楼2006-09-11 13:38:04
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TB可以区分死细胞和活细胞. 而MTT仅仅可以区分,代谢旺盛和代谢不旺盛的细胞. 有这样一种可能,就是生长抑制,细胞代谢不旺盛但是不死. 这种情况下, 生长被抑制的细胞就是TB不能染色,同时MTT也不反应. 而Necrosis的细胞就是TB能染色,同时MTT也不反应. 同时,从你的意图来看,似乎是要看看这个complex对特定cell line的作用. 就是细胞毒性作用,具体到最后,是怎么作用与这个细胞的. 那大致就是几种可能. 1.Necorsis坏死 2.Apoptosisi调亡 3.Growth arrest. 区分1/2与第三种细胞,很简单,因为前两种细胞都挂了,而3细胞还活着,TB不能染色. 区别1和2两种细胞,也很多方法. Annexin V,Tunnel,Caspase等 形态学,核染色等等,都可以. 我觉得,似乎还需要多做写工作. 因为,很多药物其实是诱导调往,所以需要AnnexinV,Tunnel等方法来看看是诱导调亡. 很大可能最后还需要做,调亡途径的检测.看看是诱导那个凋亡途径. 因为如果诱导Necrosis,似乎就没有特异性,能杀死所有细胞,包括正常细胞. 而诱导特定细胞的调亡,就能只作用与靶向细胞,有很大使用价值 [ Last edited by wj_21cn on 2006-9-11 at 22:39 ] |
4楼2006-09-11 22:35:30