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小丁山

铜虫 (小有名气)

[交流] 设计引物 已有10人参与

要克隆下面这段基因,
atgacctcagcatccaaaggaattctccgcccatttttaattgtctgcattatcctggcctgctccatggtgtgtctgttcatttacatcaagcccaccaacagctggatcttcagcccgatggagtcagccagctcagtgctgaaaatgaaaaatttcttctccaccaaaactggtgattttaatgaaactactattctgatttgggtgtggccatttgggcagacctttgaccttacatcttgccaagcaatgttcaacatccaaggatgccatctcacgacagaccgttctctgtacaacaagtctcacgcagttctgatccaccaccgagacatcagttgggatctgaccaatttacctcagcaggcgaggccacccttccagaaatggatttggatgaatttggaatcaccgactcacacaccacagaagagtggcattgagcacctgttcaacctgactctgacttatcgccgtgactcagatatccaagtgccttatggtttcttgaccgtaagcacaaaccccttcgtgtttgaagtgccaaacaaagagaagttagtgtgctgggttgtaagtaactggaaccctgagcatgccagagtcaagtattacaatgagctaagcaaaagcattgaaatccatacctatgggcaagcatttggagaatacgtgactgataaaaatttgattcctaccatatctacttgcaaattttatctttcctttgaaaactcaatccacaaagattacatcacagaaaagctctacaatgcttttctggctggctctgtgcctgttgttttggggccatctagggaaaactatgagaattatattccagcagattcattcattcatgtggaagattataactctcccagtgagctagctaagtatctgaaggaagtagacaaaaacaataaattataccttagttactttaactggaggaaagatttcacagtaaatcttcctcgattttgggaatcacatgcatgcttggcttgtgaccatgtgaaaaggcatcaagagtataaatccgttggtaatttagagaaatggttttggaattaa
我设计的引物为
F:ACTGAGCCTAGGATGACCTCAGCATCCAAAGG
R:AAGGAAAAAAGCGGCCGCTTAATTCCAAAACCATTTCTCTAAATTACC
请大家给点意见啊
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zhixuec

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3): 很活跃,继续加油啊 2011-04-19 08:27:26
反义链的引物太长

正反引物差最好不超过3-5个bp

你可以用primer5.0分析一下

还有正反链的Tm值不要超过10
酷爱の族
6楼2011-04-18 23:50:35
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 对啊 2011-04-18 18:50:57
自己用软件检测一下就可以了。。只要两条引物的TM值和GC含量差不多就可以了
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-04-18 14:53:21
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
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dhd997(金币+2): good 2011-04-18 18:51:11
反向引物后面搞那么多A干吗,这两条引物GC含量差的太多了,把那些A换成G或C平衡一下GC含量不是更好吗
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
3楼2011-04-18 17:09:01
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


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呵呵,自己学学用软件怎么分析吧。
5楼2011-04-18 23:38:37
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