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金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】这样的质粒小提有问题吗

这是我在一个保存了四年的菌种划线选取四个单克隆中提取的质粒，请各位大侠帮我分析下这是不是只有一种质粒呢？

1楼 2011-04-15 22:32:18

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专家顾问 (职业作家)

lijunj(金币+1): 2011-04-16 23:31:32

感觉前三个像是同一个质粒，后一个是一个，不过最好的验证方法就是酶切看看是不是一样的大小。。。。。

一般环状质粒跑电泳大小不太一样的。。。

2楼2011-04-15 23:02:27

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金虫 (正式写手)

lijunj(金币+1): 2011-04-16 23:31:45

第一三四个提的质粒问题不大，第二个有基因组的污染。是不是同一种质粒通过电泳条带来判断不准确，做一下酶切验证吧

3楼2011-04-16 09:16:54

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至尊木虫 (著名写手)

lijunj(金币+1): 2011-04-16 23:31:53

鉴定一下。是不是污染很难从这个图看。
方法：1质粒特异引物pcr，此法鉴定有无污染效果不大。
2酶切，分单双，这样比较保险。
3重新用你抽质粒的菌划板挑单，或者用你提取的质粒重新做转化。抗性筛选，然后再抽提。

4楼2011-04-16 11:42:55

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