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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】这样的质粒小提有问题吗
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lijunj

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】这样的质粒小提有问题吗

这是我在一个保存了四年的菌种划线选取四个单克隆中提取的质粒，请各位大侠帮我分析下这是不是只有一种质粒呢？
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1楼 2011-04-15 22:32:18
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天使托

专家顾问 (职业作家)
lijunj(金币+1): 2011-04-16 23:31:32
感觉前三个像是同一个质粒，后一个是一个，不过最好的验证方法就是酶切看看是不是一样的大小。。。。。

一般环状质粒跑电泳大小不太一样的。。。
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2楼2011-04-15 23:02:27
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
lijunj(金币+1): 2011-04-16 23:31:45
第一三四个提的质粒问题不大，第二个有基因组的污染。是不是同一种质粒通过电泳条带来判断不准确，做一下酶切验证吧
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3楼2011-04-16 09:16:54
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)
lijunj(金币+1): 2011-04-16 23:31:53
鉴定一下。是不是污染很难从这个图看。
方法：1质粒特异引物pcr，此法鉴定有无污染效果不大。
2酶切，分单双，这样比较保险。
3重新用你抽质粒的菌划板挑单，或者用你提取的质粒重新做转化。抗性筛选，然后再抽提。
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4楼2011-04-16 11:42:55
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