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【求助】HPLC 检测物质 出现基线漂移问题？ 已有2人参与
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| 在用HPLC-UV分析 isospinosin,,, spinosin 。首先，这两个化合物是7位和8位的取代基位置互换，其他都一样。在甲醇-水流动相中能分离开，洗脱梯度为70%aq-0；时间为 0-60min，出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重。换乙腈-水后，怎么也分不开。怎么办？？？ |
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2楼2011-03-28 09:57:37
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首先很感谢朋友的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上，所以，检测范围比较宽。用70％水：30甲醇－0％水：100％甲醇，时间：0－60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的，然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰，有很严重重叠，其中isospinosin ,spinosin就是在这里，但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以，样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。 基线漂移，我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。 为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件，就这两个化合物进样，梯度范围为25％乙腈－50％乙腈，0-30min, 出峰 时间24min左右，分离度0.5， 不能完全分离， 于是降低乙腈浓度，为20％乙腈－50％乙腈，时间不变，结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min. |
3楼2011-04-01 19:54:26