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【求助】HPLC 检测物质 出现基线漂移问题? 已有2人参与
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| 在用HPLC-UV分析 isospinosin,,, spinosin 。首先,这两个化合物是7位和8位的取代基位置互换,其他都一样。在甲醇-水流动相中能分离开,洗脱梯度为70%aq-0;时间为 0-60min,出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重。换乙腈-水后,怎么也分不开。怎么办??? |
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首先很感谢朋友的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上,所以,检测范围比较宽。用70%水:30甲醇-0%水:100%甲醇,时间:0-60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的,然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰,有很严重重叠,其中isospinosin ,spinosin就是在这里,但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以,样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。 基线漂移,我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。 为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件,就这两个化合物进样,梯度范围为25%乙腈-50%乙腈,0-30min, 出峰 时间24min左右,分离度0.5, 不能完全分离, 于是降低乙腈浓度,为20%乙腈-50%乙腈,时间不变,结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min. |
3楼2011-04-01 19:54:26
小醇醇
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2楼2011-03-28 09:57:37













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