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321wangke321

金虫 (正式写手)

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专业: 园艺作物采后生物学

[交流] 【求助/交流】求PCR条带微弱的原因和解决方法已有9人参与

1、大家帮忙分析下原因，为什么这么淡?
2、看看怎样让条带更加亮些？25微升体系：17微升超纯水，2.5微升buffer，2微升dNTP，1微升上游引物，1微升下游引物，0.5微升Taq酶。引物浓度是10毫摩尔每微升。
3、能不能把条带切下来再P一次？

[ Last edited by 321wangke321 on 2011-3-25 at 19:08 ]

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王者风范，一切皆有可能。

1楼 2011-03-24 22:33:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

321wangke321

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by 阿修罗Axuro at 2011-03-25 22:29:51:
是蛮弱的，不知道楼主是用的什么模板，是质粒还是基因组DNA，不过我估计应该是基因组，质粒一般不会那么弱。可以试着考虑用扩增效率高的酶看，你是用的哪款酶？或者建议楼主模板和引物都加倍，酶的量可以少点 ...

谢谢，按照你的分析，问题已经解决了。