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银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】总RNA反转录出的cDNA 怎样检测出来

我最近在做RT-PCR。总RNA提的挺好的，但反转录怎么也做不出来，怀疑是不是cDNA没有反转录成功，怎么才能检测出来呢？跑电泳看不到啊，谢谢各位大侠了！！！

1楼 2011-03-24 14:32:03

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金虫 (小有名气)

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-24 20:00:03
szylnl(金币+1): 2011-03-25 08:27:26

PCR扩内参，如果是随机引物做为引物进行的逆转录，使用18S做内参比较好，如果是Oligo为引物进行的逆转录，使用Actin，Ubquetin等比较好，这些基因基本都是持家基因，拷贝数比较多，很容易扩出。如果扩不出来，那有可能就是RNA里面含有抑制逆转录的成分，建议过一下RNA纯化柱。

5楼2011-03-24 17:36:02

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