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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR求助
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lliuzhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhangby2002 at 2011-03-19 16:41:42:
假如引物没问题的话，优化PCR体系，加大模板量以及循环数~试试看！

我现在已经加大了模板量，循环次数是34次，但是还是会出现我所述的情况，还是会时而有产物，时而没有，至于PCR体系，我之前有优化过，在优化后的一段时间内还是很稳定的会P出产物，我的退火温度倒不是很高，只有52度不知道是不是还需要优化？谢谢！
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11楼2011-03-20 10:26:06
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lliuzhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lliuzhi at 2011-03-17 08:53:50:
本人做的是普通PCR，刚开始做一直有目的产物，用的是生工的Taq酶，但是总会出现阶段性没有产物的情况，甚至都没有非特异性产物和引物二聚体。之前怀疑是酶出了问题或者是模板降解了，但是经检测后模板没有问题，也 ...

模板有限呀
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12楼2011-03-20 10:30:32
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
楼上的大侠们说的很全面了，
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13楼2011-03-20 10:39:40
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议，可以考虑多次PCR，要是没有带，你次次的PCR产物为模板，进行扩增
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14楼2011-03-20 10:40:59
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