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lliuzhi

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhangby2002 at 2011-03-19 16:41:42:
假如引物没问题的话,优化PCR体系,加大模板量以及循环数~试试看!

我现在已经加大了模板量,循环次数是34次,但是还是会出现我所述的情况,还是会时而有产物,时而没有,至于PCR体系,我之前有优化过,在优化后的一段时间内还是很稳定的会P出产物,我的退火温度倒不是很高,只有52度不知道是不是还需要优化?谢谢!
11楼2011-03-20 10:26:06
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lliuzhi

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lliuzhi at 2011-03-17 08:53:50:
本人做的是普通PCR,刚开始做一直有目的产物,用的是生工的Taq酶,但是总会出现阶段性没有产物的情况,甚至都没有非特异性产物和引物二聚体。之前怀疑是酶出了问题或者是模板降解了,但是经检测后模板没有问题,也 ...

模板有限呀
12楼2011-03-20 10:30:32
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taigongzaici

新虫 (小有名气)

楼上的大侠们说的很全面了,
13楼2011-03-20 10:39:40
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taigongzaici

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议,可以考虑多次PCR,要是没有带,你次次的PCR产物为模板,进行扩增
14楼2011-03-20 10:40:59
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