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yangxicshe

铁虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】请教：HPLC 样品检测出峰问题？？已有2人参与

新药分析梯度洗脱出峰时间提前至5分钟左右出峰

各位前辈，我最近接到一项新的实验，委托方提供的方法是甲醇：水=10:90，我们的液相色谱是反向色谱，C18柱 250mm*5mm 4.6um。由于该方法出峰时间长，理论塔板数低（三千八至四千左右），我将其方法换为乙腈，梯度洗脱（10%-30%-10%：0min-8min-12min-15min stop），出峰时间提前至5分钟左右，TP一万多，但是出峰前会上升类似于漂移，但出峰完基线在十分钟左右才开始正常漂移，峰不拖尾。请教大家如何解决?由于是新药，我们不知道其化学结构。

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1楼 2011-03-14 16:57:14

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xw2794807

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

Originally posted by yangxicshe at 2011-03-14 16:57:14:
新药分析梯度洗脱出峰时间提前至5分钟左右出峰

各位前辈，我最近接到一项新的实验，委托方提供的方法是甲醇：水=10:90，我们的液相色谱是反向色谱，C18柱 250mm*5mm 4.6um。由于该方法出峰时间长，理论塔板数 ...

我不喜欢用梯度，我认为可适当加大甲醇比例试试